Análise da expressão imunoistoquímica de parquina em astrocitomas pediátricos (pilocítico, difuso, anaplásico e glioblastoma), sua comparação com a expressão de p53 e Ki67, e correções anatomoclínicas

Abstract

Resumo: Os tumores de sistema nervoso central sao as neoplasias solidas com maiores incidencia e taxas de mortalidade na infancia. Dentre eles, os astrocitomas sao os mais comuns. Sao classificados histologicamente em graus 1 a 4, pela Organizacao Mundial de Saude, sendo agrupados em baixo e alto grau. O diagnostico se baseia em achados histopatologicos, porem existem metodos moleculares complementares que auxiliam no diagnostico e indicam prognostico. Recentemente, a proteina parquina, descoberta no contexto da doenca de Parkinson, teve papel descrito em diversas neoplasias, incluindo gliomas dos adultos. O presente trabalho tem o objetivo de avaliar a presenca de parquina atraves de pesquisa imunoistoquimica em astrocitomas da faixa etaria pediatrica, correlacionando-a com o grau tumoral, com a presenca de p53 e niveis de Ki67, alem de correlacao com variaveis anatomoclinicas, incluindo sobrevida e desfecho obito. Para tal, amostras de astrocitomas pediatricos em blocos de parafina, provenientes do Hospital Pequeno Principe, diagnosticados entre os anos de 2003 a 2015, foram selecionados, sendo ao todo 108 casos. Estas amostras foram submetidas a pesquisa imunoistoquimica de parquina, p53 e Ki67. A leitura da marcacao imunoistoquimica de parquina foi realizada por analise morfometrica e morfologica por Allred modificado. Cortes histologicos de p53 e Ki67 foram submetidos a analise morfologica, por escore de Allred modificado e contagem em hotspot, respectivamente. Observou-se menor expressao de parquina nos astrocitomas de alto grau, em comparacao aos de baixo grau, por analise morfometrica (p = 0,011) e morfologica (p = 0,036). A proteina p53 apresentou comportamento inverso, tendo uma maior expressao imunoistoquimica nos tumores de alto grau (p < 0,001). A porcentagem de Ki67 tambem foi maior no grupo dos astrocitomas de alto grau (p < 0,001), em concordancia com dados da literatura. A perda de expressao da proteina parquina pelos metodos de imunoistoquimica pode estar relacionada a mutacoes no gene PRKN, como ja descrito em outras neoplasias e em gliomas da faixa etaria adulta. Observou-se uma correlacao entre sobrevida e grau histologico tumoral, assim como com a expressao imunoistoquimica de p53. O mesmo aconteceu com a mortalidade. A expressao de parquina, por outro lado, nao apresentou, nesse estudo, resultado estatisticamente significativo, quando comparada a sobrevida e desfecho obito. Dessa forma, a parquina se mostrou como um marcador de grau histologico em astrocitomas infantis, sendo menos expressa nos tumores de alto grau. Nesse estudo, nao foi constatado impacto prognostico da parquina. Porem, como esse e o primeiro estudo a avaliar a parquina no contexto de astrocitomas pediatricos, pesquisas futuras podem mudar esse cenario. Palavras-chave: Gliomas pediatricos. Astrocitomas pediatricos. Parquina. p53.

Abstract: Central nervous system tumors are solid tumors with the highest incidence and mortality rates in childhood. Among them, astrocytomas are the most common. Astrocytomas are histologically graded by the World Health Organization into grades 1 to 4. These four grades can be grouped into low grade and high grade astrocytomas. Diagnosis is based on histopathology, but there are ancillary molecular tests with both diagnostic and prognostic features. Parkin, a protein discovered in the context of Parkinson's disease, has been recently implicated in several tumors, including gliomas in adults. The aim of this study is to evaluate parkin immunohistochemical expression in pediatric astrocytomas. Then, compare this immunostaining to histological grade, p53 and Ki67 immunohistochemical expression, as well as anatomoclinical variables, including survival and mortality rates. One hundred and eight formalin-fixed paraffin-embedded samples from pediatric astrocytomas, diagnosed between 2003 and 2015 in Hospital Pequeno Principe were selected. These samples were submitted to immunohistochemical study, regarding parkin, p53 and Ki67. Parkin histological slides were analyzed by morphometry and morphology, through modified Allred score. Histological slides of p53 and Ki67 were analyzed morphologically, by modified Allred score and hotspot counting, respectively. Results showed lower parkin expression in high grade astrocytomas, compared to low grade, in morphometric (p = 0,011), as well as in morphological analysis (p = 0,036). p53 expression demonstrated opposite behavior. High grade tumors showed higher immunohistochemical expression (p < 0,001). Ki67 immunostaining percentage was also higher in high grade astrocytomas (p < 0,001), in consonance with literature database. Parkin loss of immunohistochemical expression may be related to PRKN gene mutations, as it has been described in other tumors, including gliomas in adults. Results showed also correlation between survival rates and histological grade, as well as p53 immunostaining. The same correlations were observed regarding mortality rates. The evaluation of parkin expression, on the other hand, demonstrated no statistical significance in this study, when compared to survival and mortality rates. Thus, parkin works as a histological grade marker in pediatric astrocytomas since it has lower immunohistochemical expression. in high grade astrocytomas. Our study did not show a prognostic role for this protein. However, since this is the first study evaluating parkin in pediatric gliomas, further research may change this scenario. Keywords: Pediatric gliomas. Pediatric astrocytomas. Parkin. p53.