Fortalecimento da meliponicultura no território paranaense : perfil químico e avaliação da ação neuroprotetora da própolis e geoprópolis produzidas por abelhas nativas da região litorânea e microrregião de Curitiba

Abstract

Resumo: A meliponicultura constitui uma prática que integra princípios da agricultura sustentável e dos saberes tradicionais, além de desempenhar papel estratégico na conservação das abelhas nativas sem ferrão (ASF). Dessa forma, contribui diretamente para o ecodesenvolvimento e para a conservação da biodiversidade. Entre seus subprodutos, se destaca a própolis paranaense, especialmente a geoprópolis azul produzida pela espécie mandaçaia, encontrada exclusivamente no litoral do Paraná, a qual tem despertado interesse em estudos de bioprospecção. O presente estudo avaliou o perfil químico dos extratos etanólicos de própolis/geoprópolis (EEP), bem como a toxicidade aguda (DL50) e os efeitos ansiolíticos e anticonvulsivantes de EEP e frações de diclorometano (FDi) provenientes de duas regiões do Estado: a microrregião de Curitiba (MC) e a região do Litoral (RL). Os ensaios foram realizados em modelo experimental zebrafish (Danio rerio) adulto. Na microrregião de Curitiba, foram analisados EEP e FDi das espécies de abelhas mandaçaia, jataí e manduri; na região do Litoral, apenas amostras de mandaçaia foram incluídas. Os EEP foram particionados nas frações: aquosa (FAq), diclorometano (FDi), acetato de etila (FAc) e butanol (FBu). A caracterização química dos EEP foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa (HPLC/MS). A atividade ansiolítica foi avaliada em zebrafish por administração intraperitoneal nas doses de 40, 200 e 400 mg/kg (MC) e 4, 20 e 40 mg/kg (RL), utilizando Diazepam (4 mg/kg) como controle positivo no teste Claro Escuro. A ação anticonvulsivante foi investigada nas mesmas dosagens, por meio da observação do comportamento durante a progressão dos estágios convulsivos induzidos por Pentilenotetrazol (PTZ). A análise da matriz química revelou a presença de diterpenos, com predominância de diterpenos ácidos, bem como de triterpenos e flavonoides nos extratos etanólicos de própolis (EEP) analisados, tanto da MC quanto da RL. Quanto ao efeito ansiolítico, entre as amostras da MC, apenas a FDi de mandaçaia não indicou efeito significativo; todos os demais EEP e FDi apresentaram efeito equiparável ao Diazepam. A investigação do mecanismo de ação revelou a via GABAérgica para os EEP de mandaçaia e jataí, bem como para a FDi de jataí. Para a FDi de manduri, observou-se envolvimento da via serotoninérgica, por meio da ativação dos receptores 5-HT3A/3B. O efeito anticonvulsivante foi constatado nas três dosagens de EEP de jataí e na dosagem de 200 mg/kg de FDi de manduri, o que representa o aumento da latência para a progressão dos estágios convulsivos. Já para as amostras de mandaçaia da região do Litoral, o efeito ansiolítico foi representativo apenas para a FDi de uma das amostras, exclusivamente na menor dose testada (4 mg/kg), cujo mecanismo de ação indicou a via GABAérgica. Ademais, nenhuma das amostras do litoral, nas dosagens testadas, apresentou efeito anticonvulsivante. Esses resultados sugerem que a própolis/geoprópolis das duas regiões do Paraná têm um efeito ansiolítico e anticonvulsivante promissor, o que pode contribuir para o desenvolvimento de produtos farmacêuticos naturais associados à identidade e aos recursos do território

Abstract: Meliponiculture constitutes a practice that integrates principles of sustainable agriculture and traditional knowledge, while also playing a strategic role in the conservation of native stingless bees (NSB). In this way, it directly contributes to ecodevelopment and biodiversity conservation. Among its by-products, Paraná propolis stands out, particularly the blue geopropolis produced by the mandaçaia species, found exclusively on the coast of Paraná, which has attracted interest in bioprospecting studies. The present study evaluated the chemical profile of ethanolic extracts of propolis/geopropolis (EEP), as well as the acute toxicity (LD50) and the anxiolytic and anticonvulsant effects of EEP and dichloromethane fractions (FDi) from two regions of the state: the Curitiba microregion (MC) and the Coastal region (RL). The assays were conducted using an adult zebrafish (Danio rerio) experimental model. In the Curitiba microregion, EEP and FDi from the stingless bee species mandaçaia, jataí, and manduri were analyzed; in the Coastal region, only mandaçaia samples were included. The EEP were partitioned into the following fractions: aqueous (FAq), dichloromethane (FDi), ethyl acetate (FAc), and butanol (FBu). Chemical characterization of the EEP was performed by high-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (HPLC/MS). Anxiolytic activity was assessed in zebrafish by intraperitoneal administration at doses of 40, 200, and 400 mg/kg (MC) and 4, 20, and 40 mg/kg (RL), using Diazepam (4 mg/kg) as a positive control in the Light–Dark test. Anticonvulsant activity was investigated at the same doses by observing behavioral progression through seizure stages induced by pentylenetetrazole (PTZ). Analysis of the chemical matrix revealed the presence of diterpenes, predominantly acidic diterpenes, as well as triterpenes and flavonoids in the analyzed ethanolic propolis extracts (EEP) from both MC and RL. Regarding anxiolytic effects, among the MC samples, only the mandaçaia FDi did not show a significant effect; all other EEP and FDi exhibited effects comparable to Diazepam. Investigation of the mechanism of action revealed involvement of the GABAergic pathway for the mandaçaia and jataí EEP, as well as for the jataí FDi. For the manduri FDi, involvement of the serotonergic pathway was observed, through activation of 5 HT3A/3B receptors. Anticonvulsant effects were observed at all three doses of jataí EEP and at the 200 mg/kg dose of manduri FDi, as evidenced by increased latency to progression through seizure stages. For the mandaçaia samples from the Coastal region, a representative anxiolytic effect was observed only for the FDi of one sample, exclusively at the lowest tested dose (4 mg/kg), with the mechanism of action indicating involvement of the GABAergic pathway. Furthermore, none of the Coastal samples exhibited anticonvulsant effects at the tested doses. These findings suggest that propolis/geopropolis from the two regions of Paraná exhibit promising anxiolytic and anticonvulsant properties, which may contribute to the development of natural pharmaceutical products associated with territorial identity and local resources