Caracterização da galactose oxidase intracelular do mutante Gal Ara de Dactylium dendroides (DD09)

Abstract

Resumo: A galactose oxldase intracelular do mutante Gal Ara de Dactyltwn. dendroides (DDOS), foi purificada de mlcéllos de 36 horas e de 72 horas. 0 peso molecular das enzimas homogêneas foi de 70.000 e 68.000 daltons respectivamente. 0 ph ótimo de catálise está entre 6,8 e 7,0 e a temperatura ótima foi de 30*C. A galactose oxldase Intracelular do mutante catalisa a oxldação da Q-galactose e da dlhidrox1acetona e apresentou uma clnética não mlchaellana para ambos substratos. 0 valor do Km para a Q-galactose foi de 77,0 " r r mM e 100 mM para a enzima de 36 horas e de 72 horas de crescimento, respectivamente. 0 valor do Kmann para a «PP dlhldroxlacetona encontrado foi de 18 mM e 27 mM para a enzima de 36 horas e de 72 horas respectivamente. As duas formas enzlmátlcas apresentam cooperativIdade positiva, como sugerido pelos valores de coeficiente de Hill (n ) de 1,2 para a Q-galactose e de 1,6 H para a dIhIdroxIacetona. "A análise da composição de carboidratos revelou um teor de gllcosilação de 4,54 mg% para a enzima de 36 horas e 4,27 mg% para a enzima de 72 horas de crescimento, dos quais 3,30 mg e 3,16 mg respectivamente, foram resistentes à ft ellminação.