Impactos do PFOA no processo de neurulação juncional em Gallus gallus

Abstract

Resumo : O ácido perfluorooctanóico (PFOA) é um produto sintético empregado na fabricação de utensílios industriais e domésticos. Apesar da relevância econômica, esse composto é persistente e tende a se acumular nos órgãos e tecidos humanos, resultando em distúrbios diversos. Entre as alterações observadas, o PFOA interfere nos processos de neurulação primária (NP) e secundária (NS), que são mecanismos responsáveis pela formação do tubo neural (TN), precursor do sistema nervoso central. A NP constitui o TN da região anterior pela dobra da placa neural, enquanto a NS é responsável pela formação dessa estrutura pela condensação das células mesenquimais na porção caudal. Em estudos recentes, foram descritos movimentos morfogenéticos distintos na região de transição entre a NP e NS, conhecidos como neurulação juncional (NJ), que conecta a porção anterior e posterior do TN. Embora a contaminação por PFOA já tenha sido associada a malformações durante a NP e NS, até o momento não foram encontradas evidências de sua relação com a NJ. Sendo assim, com o intuito de incrementar o estudo da neurotoxicidade do PFOA durante a neurulação, o presente trabalho investigou os impactos desse contaminante na integridade e estruturação tecidual durante a NJ em embriões de Gallus gallus. Para isso, 10 ovos foram injetados com NaCl 0,9% (grupo controle) e 10 com PFOA 5 ng.ml 1 (grupo exposto) e, em seguida, incubados por 40-45 horas para a obtenção de embriões no estádio HH11. Após a incubação, os embriões foram fixados, emblocados em Historesina®, cortados transversalmente na espessura de 5 µm e, então, submetidos a coloração. Parte dos cortes de 6 embriões (3 controles + 3 expostos) foram corados em hematoxilina e eosina (H&E) para a análise morfológica qualitativa e semiquantitativa via score morfológico. A outra parte foi submetida a marcação histoquímica com ácido periódico Schiff (PAS) para a análise semiquantitativa da integridade tecidual. A análise morfológica revelou desestruturação da placa neural, falha na transição epitelial mesenquimal, invasão celular e apoptose. O score morfológico atribuiu valores de alterações maiores no grupo exposto. A análise da integridade tecidual mostrou que embriões expostos ao PFOA apresentaram instabilidade estrutural em comparação com o controle, com redução significativa de 30% na intensidade de marcação. Com base nos resultados obtidos, juntamente com a revisão de literatura existente, pode-se concluir que o PFOA atua como um agente degenerativo durante a neurulação, promovendo algum tipo de disfunção em todas as etapas desse processo descritas até o momento

Abstract : O ácido perfluorooctanóico (PFOA) é um produto sintético empregado na fabricação de utensílios industriais e domésticos. Apesar da relevância econômica, esse composto é persistente e tende a se acumular nos órgãos e tecidos humanos, resultando em distúrbios diversos. Entre as alterações observadas, o PFOA interfere nos processos de neurulação primária (NP) e secundária (NS), que são mecanismos responsáveis pela formação do tubo neural (TN), precursor do sistema nervoso central. A NP constitui o TN da região anterior pela dobra da placa neural, enquanto a NS é responsável pela formação dessa estrutura pela condensação das células mesenquimais na porção caudal. Em estudos recentes, foram descritos movimentos morfogenéticos distintos na região de transição entre a NP e NS, conhecidos como neurulação juncional (NJ), que conecta a porção anterior e posterior do TN. Embora a contaminação por PFOA já tenha sido associada a malformações durante a NP e NS, até o momento não foram encontradas evidências de sua relação com a NJ. Sendo assim, com o intuito de incrementar o estudo da neurotoxicidade do PFOA durante a neurulação, o presente trabalho investigou os impactos desse contaminante na integridade e estruturação tecidual durante a NJ em embriões de Gallus gallus. Para isso, 10 ovos foram injetados com NaCl 0,9% (grupo controle) e 10 com PFOA 5 ng.ml 1 (grupo exposto) e, em seguida, incubados por 40-45 horas para a obtenção de embriões no estádio HH11. Após a incubação, os embriões foram fixados, emblocados em Historesina®, cortados transversalmente na espessura de 5 µm e, então, submetidos a coloração. Parte dos cortes de 6 embriões (3 controles + 3 expostos) foram corados em hematoxilina e eosina (H&E) para a análise morfológica qualitativa e semiquantitativa via score morfológico. A outra parte foi submetida a marcação histoquímica com ácido periódico Schiff (PAS) para a análise semiquantitativa da integridade tecidual. A análise morfológica revelou desestruturação da placa neural, falha na transição epitelial mesenquimal, invasão celular e apoptose. O score morfológico atribuiu valores de alterações maiores no grupo exposto. A análise da integridade tecidual mostrou que embriões expostos ao PFOA apresentaram instabilidade estrutural em comparação com o controle, com redução significativa de 30% na intensidade de marcação. Com base nos resultados obtidos, juntamente com a revisão de literatura existente, pode-se concluir que o PFOA atua como um agente degenerativo durante a neurulação, promovendo algum tipo de disfunção em todas as etapas desse processo descritas até o momento