Expressão diferencial de mIRNAS em tecido prostático tumoral e não tumoral fixado em parafina

Abstract

Resumo : O câncer de próstata se desenvolve na glândula prostática, que faz parte do sistema reprodutor masculino. No Brasil, o câncer de próstata é o tipo mais comum de câncer entre os homens e representa um dos principais problemas de saúde pública. A mortalidade por câncer em geral é maior nos homens e tem aumentado nas últimas décadas. Na fase inicial, o câncer de próstata pode não apresentar sintomas, ou, quando apresenta, são mais comuns a dificuldade de urinar, presença de sangue na urina, diminuição do jato urinário e maior frequência urinária. Caso sejam detectados esses sinais são realizados dois exames para investigar a existência de câncer de próstata, que são o exame de toque retal e o exame de Antígeno Prostático Específico (PSA). O diagnóstico por esses métodos nem sempre é eficaz, podendo levar a um tratamento errôneo para os pacientes, por isso a necessidade da busca de biomarcadores para o diagnóstico e prognóstico dessa doença. Os microRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs endógenos não-codificantes que agem como reguladores pós-transcricionais e estão envolvidos no desenvolvimento de câncer. Os miRNAs são excelentes candidatos a biomarcadores moleculares porque podem ser isolados de vários tipos de amostras biológicas e geralmente são estáveis e resistentes a diferentes condições de armazenamento. Além disso, podem ser facilmente detectados e quantificados por meio de técnicas como RTq-PCR e sequenciamento de nova geração. Neste estudo, foram coletadas 36 amostras de tecido fixado em parafina, obtido de 11 pacientes submetidos à prostatectomia. Nessas peças foram selecionadas regiões tumorais e não tumorais pelo patologista, para análise da expressão dos seguintes miRNAs: miR-221,5p, miR-205-5p, miR-25-3p, miR-155-5p, miR-39-3p. Os miRNAs com diferença significativa de expressão entre o material parafinado tumoral e margem normal, também foram analisados em 20 amostras de plasma de pacientes com câncer de próstata e 20 controles saudáveis. Os resultados indicaram que a expressão dos miRNAs varia entre as regiões tumorais e não tumorais em pacientes com câncer de próstata. Os miRNAs 205-5p e 221-5p apresentaram uma expressão significativamente maior nas regiões não tumorais em comparação com as regiões tumorais, e o miRNA 205-5p teve a expressão significativamente maior no plasma de pacientes com câncer em comparação ao plasma dos controles saudáveis. O estudo contribui para o avanço do conhecimento na área de biologia molecular do câncer de próstata, destacando a importância da análise desses pequenos RNAs na compreensão da biologia tumoral e o potencial desses miRNAs em serem utilizados como biomarcadores para o câncer de próstata

Abstract :Prostate cancer develops in the prostate gland, which is part of the male reproductive system. In Brazil, prostate cancer is the most common type of cancer among men and represents one of the main public health problems. Overall cancer mortality is higher in men and has been increasing in recent decades. In the early stages, prostate cancer may not present symptoms, or when present, common symptoms include difficulty urinating, presence of blood in the urine, decreased urine flow, and increased frequency of urination. If these signs are detected, two tests are performed to investigate the presence of prostate cancer: the digital rectal exam and the Prostate-Specific Antigen (PSA) test. Diagnosis through these methods is not always effective and can lead to incorrect treatment for patients, hence the need to search for biomarkers for the diagnosis and prognosis of this disease. MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding endogenous RNAs that act as post-transcriptional regulators and are involved in cancer development. miRNAs are excellent candidates as molecular biomarkers because they can be isolated from various types of biological samples and are generally stable and resistant to different storage conditions. Furthermore, they can be easily detected and quantified using techniques such as RT-qPCR and next-generation sequencing. In this study, 36 paraffin embedded tissue samples were collected from 11 patients who underwent prostatectomy. Tumor and non-tumor regions were selected by the pathologist for analysis of the expression of the following miRNAs: miR-221-5p, miR-205-5p, miR 25-3p, miR-155-5p, and miR-39-3p. miRNAs that showed significant differences in expression between tumor and normal margin paraffin-embedded material were also analyzed in 20 plasma samples from prostate cancer patients and 20 healthy controls. The results indicated that miRNA expression varies between tumor and non-tumor regions in prostate cancer patients. miR-205-5p and miR-221-5p showed significantly higher expression in non-tumor regions compared to tumor regions, and miR-205-5p had significantly higher expression in the plasma of cancer patients compared to healthy controls. The study contributes to the advancement of knowledge in the field of molecular biology of prostate cancer, highlighting the importance of analyzing these small RNAs in understanding tumor biology and the potential of these miRNAs to be used as biomarkers for prostate cancer