Efeito da (1 - 3), (1 - 6) ß-d-glucana isolada do Pholiota nameko na colite ulcerativa induzida por DSS

Abstract

Resumo : A colite ulcerativa é uma doença inflamatória crônica, caracterizada por provocar uma inflamação difusa, afetando a mucosa do cólon, culminando em alteração da permeabilidade da barreira intestinal. Sua etiologia permanece desconhecida, mas estudos indicam que a colite ulcerativa apresenta etiopatologia multifatorial e que está principalmente relacionada a fatores genéticos e ambientais associados aos hábitos de vida. São sintomas comuns a dor abdominal aguda, sangramento retal e alterações na motilidade intestinal. Considerando os aspectos da doença e dos tratamentos disponíveis atualmente, que possuem baixa eficácia associados a diversos efeitos adversos, é possível sugerir uma forte relação da colite ulcerativa com uma baixa qualidade de vida do paciente. Sendo assim, se faz necessária a busca por uma terapia mais eficaz e que proporcione resultados positivos para o bem-estar do indivíduo portador da doença em questão. Nesse sentido, tendo conhecimento sobre os efeitos imunomoduladores das ß-glucanas, polissacarídeos presentes em cogumelos e bactérias, por exemplo, neste trabalho, investigamos as propriedades terapêuticas referentes à (1?3), (1?6) ß-D-glucana, um polissacarídeo isolado do cogumelo Pholiota nameko. Foram utilizados camundongos fêmeas, Mus musculus, variedade Swiss, de aproximadamente 30 gramas, sendo administrado sulfato sódico de dextrana (DSS) durante 5 dias na água de beber, a fim de induzir a colite. Os animais foram separados em 5 grupos, sendo que um grupo recebeu veículo (água 1 mL/kg) e nos demais que receberam DSS, foram tratados com veículo (água 1 mL/kg) ou (1?3),(1?6) ß-D-glucana nas doses de 1, 10 ou 100 mg/kg, durante 7 dias, sendo sacrificados no oitavo dia, para a remoção e análise do cólon. Foram avaliados diariamente parâmetros como índice de atividade da doença (IAD), incluindo perda de peso, sangramento retal e comprimento do cólon. Para investigar os efeitos da (1?3),(1?6) ß-D-glucana, foram avaliados a hipersensibilidade mecânica visceral (filamentos de von Frey), parâmetros inflamatórios (atividade da MPO), avaliação do bem-estar (teste de ninho), parâmetros histológicos (HE, PAS e AB) e análise de indicadores bioquímicos (creatinina e ALT/TGP) (CEUA/BIO– UFPR, Nº 1451). Os resultados obtidos demonstraram que o tratamento com (1?3),(1?6) ß-D-glucana não foi capaz de conter a piora do quadro, pois todos os grupos que receberam DSS perderam peso, apresentaram sangue oculto, sofreram diminuição do comprimento do cólon e apresentaram o mesmo índice de atividade da doença no 8° dia. Houve aumento da alodinia induzida pelo DSS a partir do 4° dia. Além disso, nenhuma dose foi capaz de melhorar o bem-estar e inflamação (níveis de MPO). Também ocorreu aumento da espessura da mucosa, redução da espessura da camada muscular e da secreção de mucinas neutras e ácidas em todos os grupos que receberam DSS. Sendo assim, os dados não demonstram resultados satisfatórios da (1?3),(1?6) ß-D-glucana como tratamento da colite ulcerativa utilizando este modelo experimental

Abstract : Ulcerative colitis is a chronic inflammatory disease characterized by diffuse inflammation that affects the mucosa of the colon, leading to changes in the permeability of the intestinal barrier. Its etiology remains unknown, but studies indicate that ulcerative colitis has a multifactorial etiopathology and is primarily related to genetic and environmental factors associated with lifestyle habits. Common symptoms include acute abdominal pain, rectal bleeding, and changes in intestinal motility. Considering the aspects of the disease and currently available treatments, which have low efficacy and various adverse effects, it is possible to suggest a strong relationship between ulcerative colitis and a low quality of life for the patient. Therefore, there is a need to search for a more effective therapy that provides positive outcomes for the well-being of individuals with this disease. In this regard, having knowledge about the immunomodulatory effects of ß-glucans, polysaccharides found in mushrooms and bacteria, for example, in this study, we investigated the therapeutic properties of (1?3), (1?6) ß-D-glucan, a polysaccharide isolated from Pholiota nameko. Female Swiss mice (Mus musculus) weighing approximately 30 grams were used. Sodium dextran sulfate (DSS) was administered in the drinking water for 5 days to induce colitis. The animals were divided into 5 groups, with one group receiving a vehicle (1 mL/kg of water) and the 4 DSS-treated groups receiving either a vehicle (1 mL/kg of water) or (1?3), (1?6) ß-D-glucan (1, 10, or 100 mg/kg) for 7 days. On the eighth day, the animals were sacrificed for removal and analysis of the colon. Daily parameters such as disease activity index (DAI), including weight loss, rectal bleeding, and colon length, were evaluated. To investigate the effects of (1?3), (1?6) ß-D-glucan, visceral mechanical hypersensitivity (von Frey filaments), inflammatory parameters (MPO activity), well-being assessment (nest test), histological parameters (PAS, AB, and HE), and analysis of biochemical indicators (creatinine and ALT/TGP) were evaluated (CEUA/BIO– UFPR, No. 1451). The results obtained demonstrated that (1?3), (1?6) ß-D-glucan was not able to halt the worsening of the condition, as all the DSS-treated groups experienced weight loss, occult blood, reduction in colon length, and had the same disease activity index on the 8th day. Mechanical allodynia induced by DSS increased from the 4th day onwards. Additionally, no dose was able to improve well-being and inflammation (MPO levels). There was also an increase in mucosal thickness, a reduction in the thickness of the muscular layer, and a decrease in the secretion of acidic and neutral mucins in all the DSS-treated groups. Therefore, the data do not demonstrate satisfactory results for (1?3), (1?6) ß-D-glucan as a treatment for ulcerative colitis using this experimental model