Caracterização da atividade enzimática de variantes da butirilcolinesterase (BChE)

Abstract

Resumo : A acetilcolinesterase (AChE) e a butirilcolinesterase (BChE) são duas enzimas importantes no metabolismo de moléculas de colina. A AChE é particularmente importante no mecanismo de controle da concentração de acetilcolina no encéfalo. A BChE também é chamada de pseudo-colinesterase, devido a sua natureza menos específica. Além do metabolismo colinérgico a BChE tem papel importante também no metabolismo de ésteres de substâncias exógenas, tendo função de desintoxicação. Fármacos como a succinilcolina e o mivacúrio, anestésitos bastante utilizados na prática clínica apresentam interações peculiares quando administrados em indivíduos portadores de certos polimorfismos da BChE. Alguns desses polimorfismos podem causar quadros de efeito prolongado após a utilização do anestésico. Dessa maneira, a identificação de polimorfismos deve ser ferramenta útil para mapear indivíduos potencialmente suscetíveis a efeitos mais agudos de medicamentos anestésicos específicos. Para a realização do trabalho foram utilizados conjuntos de primer alelo específicos em reações de PCR-SSP com a finalidade de identificar genótipos da variante rs1799807, conhecida como mutação A, frequentemente associada a quadros de susceptibilidade aos efeitos de succinilcolina. Foi realizado também a avaliação da atividade enzimática plasmática da BChE nos mesmos indivíduos através da mensuração da absorbância de substâncias formadas pela ação indireta da BChE em leituras sequenciais em espectrofotômetro. Foram identificados apenas três indivíduos portadores do alelo A. Não foi constatado diferença estatística da atividade enzimática relacionada aos alelos. Não foi possível fazer inferências em relação à atividade enzimática e suas associações com os genótipos devido ao baixo número de amostras utilizadas

Abstract : Acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) are important enzymes in choline molecules metabolism. The AChE is particularly relevant on concentration control mechanism of acetylcholine on brain tissue. BChE is also known as pseudo-cholinesterase, for its less specific nature. In addition to its role on colinergic methabolism, the BChE has an important role on exogenous subtances catalysis, acting as a detox agent. Drugs such succiylcholine and mivacurium are widely used on clinical routines. When administraded on individuals with certain polimorfisms of BChE, those drugs may present peculiar activity. Some of those BChE polimorfisms are able to induce prolonged periods of anesthesia effects. On this matter, screening of polimorfisms should be an usefull tool for mapping potentialy susceptible individuals for acute effects caused by anesthetic drugs. PCR-SSP reactions were used for genotyping a group of samples for the rs1799807 variant, the A variant. For evaluating BChE plasmatic activity, a procotol for measuring absorbances of sub products of BChE methabolism was used. Those results were obtaing on TECAN plate spectrephotometre. Three individual samples were identified as heterozygotes on A variant. The low number of samples made difficult to make any assumptions regarding the association with polimorphismd with enzyme activity. It wasn’t possible to make any inferences on enzyme activity and polimorfisms relation