Efeitos de poluentes orgânicos em culturas 3D de células de câncer de mama

Abstract

Resumo : O câncer de mama, a neoplasia mais diagnosticada globalmente em 2020, permanece como um grande desafio à saúde pública, exigindo inovações para compreender melhor seus mecanismos e tratamentos. Os modelos bidimensionais, amplamente utilizados, apresentam limitações em reproduzir o microambiente tumoral de forma realista, o que torna o cultivo tridimensional (3D) de esferoides uma alternativa promissora por simular condições mais próximas das observadas in vivo. Este estudo adaptou um protocolo para a formação de esferoides utilizando as linhagens tumorais MCF-7 e MDA-MB-231. Para a formação dos esferoides, as células foram subcultivadas para microplacas de de 96 poços com fundo não aderente. O primeiro passo deste trabalho foi testar várias densidades celulares para determinar a quantidade ideal, sendo selecionada a densidade de 1x10³ células por esferoide. Os esferoides formados foram expostos por 15 dias aos contaminantes químicos metoxicloro, 2,4-dihidroxibenzofenona (BP-1), bisfenol-A (BPA) e ácido perfluorooctanóico (PFOA). A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio do metabolismo do Resazurin, conduzido em quatro experimentos independentes. Os resultados mostram que, enquanto os esferoides da linhagem MCF-7 apresentaram comportamento semelhante ao controle, os da linhagem MDA-MB-231 exibiram aumento significativo na metabolização do corante, com variações nos tempos 24 (180%) e 48 horas (170%) para o composto PFOA. Para o BPA,o aumento ocorreu somente em 24 horas (280%). O composto BP-1 teve alterações nos tempos 24 (150%) e 48 horas (140%). Na avaliação do tamanho dos esferoides, não houve diferenças significativas com relação a área para ambas as linhagens celulares. Com isso, o protocolo proposto mostrou-se eficiente na formação de esferoides e destaca o potencial do modelo 3D para investigações relacionadas à exposição a contaminantes químicos