Rastreamento de mutação no gene NPM1, por PCR-melting, em amostras de pacientes com Leucemia Mielóide Aguda

Abstract

Resumo : Leucemia Mielóide Aguda (LMA) é uma neoplasia que se estabelece na medula óssea a partir da proliferação clonal de células-tronco anormais de linhagem mielóide, sendo a leucemia que mais acomete adultos e também aquela com a menor taxa de sobrevivência para pacientes diagnosticados. Análises genéticas têm papel fundamental no seu diagnóstico, impactando no prognóstico e na escolha de tratamentos mais adequados. Mutações no gene NPM1 têm sido incluídas para a estratificação de risco, mas não há consenso sobre o melhor teste genético para seu rastreamento. Neste trabalho, nós testamos um ensaio para verificar a aplicação do PCR-melting na análise desse marcador. A partir de uma amostra controle positivo encontramos a temperatura de melting correspondente à mutação. Avaliando um conjunto de 39 pacientes previamente diagnosticados com LMA e comparando-os com os dados desse controle nossos dados apontam para dois casos suspeitos, mas que até o presente momento ainda aguardam os resultados de sequenciamento de Sanger como forma de validação ao protocolo. A padronização do método de PCR-melting pode contribuir de maneira significativa para um rastreio inicial de pacientes, e pode ser uma estratégia a ser adotada para evitar gastos excessivos no sistema de saúde pública, já que apenas aquelas suspeitas podem então ser encaminhadas para métodos mais laboriosos e de alto custo, como o sequenciamento de DNA