Refinamento da estrutura cristalográfica do fator de iniciação da tradução eIF4E5 de Trypanosoma brucei e comparação estrutural com homólogos

Abstract

Resumo : Protozoários da classe kinetoplastida despertam interesse da ciência pela sua importância como agentes etiológicos de doenças como a tripanosomíase humana africana, doença de Chagas e leishmanioses. Além disso, também são estudados pela sua história evolutiva e por suas características celulares e moleculares únicas, desde a organização de seu material genético até a regulação de vias importantes para manutenção de seu metabolismo. Este trabalho tem como foco a iniciação da tradução, orquestrada por doze fatores cujo papel é realizar a montagem do ribossomo 80S competente para a elongação. Esta etapa da tradução é altamente regulada, consistindo no ponto mais importante de controle do metabolismo de proteínas. Devido às suas peculiaridades em tripanossomatídeos comparados a outros organismos eucariotos, a elucidação e caracterização estrutural e funcional das proteínas envolvidas na iniciação da tradução se torna relevante, entre as quais aquelas que formam o complexo eIF4F (eIF4E, eIF4G, eIF4A), que possui papel relevante neste processo. Os tripanossomatídeos possuem seis homólogos dos fatores eIF4Es, a proteína ligadora da estrutura cap presente na extremidade 5’ do RNA mensageiro. A presença destes seis homólogos constitui mais uma característica importante destes organismos. Por conta disso, o laboratório de Biologia Estrutural e Engenharia de Proteínas do Instituto Carlos Chagas (FIOCRUZ – PR) têm trabalhado extensivamente para desvendar e compreender o papel destes fatores na iniciação da tradução. O objetivo é elucidar os mecanismos que podem diferenciar estas proteínas, além de seus papéis na regulação da tradução e mecanismos bioquímicos envolvidos na interação com os parceiros dos complexos de iniciação. Sabendo disso, o objetivo deste projeto foi refinar a estrutura cristalográfica do fator de iniciação da tradução eIF4E5 de Trypanosoma brucei (TbEIF4E5), co-cristalizado com o análogo cap-4 do mRNA, e analisado por difração de raios X. Além disso, realizamos a comparação estrutural de TbEIF4E5 com as proteínas homólogas de T. cruzi e L. major, além de eIF4E de humanos