Desenvolvimento de biossensor eletroquímico para detecção não-invasiva da bactéria Helicobacter pylori em amostras de saliva

Abstract

Resumo : A infecção pela bactéria carcinogênica Helicobacter pylori acomete mais de metade da população mundial, com maior prevalência em países subdesenvolvidos, e está associada ao desenvolvimento de doenças como gastrite crônica, úlcera péptica e câncer gástrico. O padrão-ouro para diagnóstico da infecção é o exame histopatológico feito a partir de biópsia de da mucosa gástrica obtida por endoscopia digestiva, que é um exame invasivo, complexo e demorado que demanda profissionais altamente qualificados. Em busca de uma alternativa diagnóstica mais acessível, fácil e não-invasiva, no presente trabalho foi desenvolvido um biossensor eletroquímico impedimétrico para detecção de antígeno de H. pylori em amostras de saliva. O biossensor foi construído a partir de eletrodo de grafite impresso modificado com nanotubos de polipirrol e hidróxido de níquel, sobre o qual foram imobilizados anticorpos anti-HopQ, uma proteína estrutural da bactéria importante para sua adesão ao epitélio do estômago. A construção do biossensor foi caracterizada por microscopia eletrônica de varredura e eletroquimicamente. A detecção da proteína-alvo foi realizada através da técnica de Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS). A curva analítica do biossensor foi construída em amostras de saliva artificial adicionadas da proteína HopQ comercial. A faixa linear de detecção do método é de 0,5 pg/mL a 3 ng/mL, com limite de quantificação (LOQ) de 0,5 pg/mL. Amostras reais de saliva adicionadas da proteína comercial também foram testadas para validação do dispositivo. O biossensor eletroquímico baseado em EIS desenvolvido combina materiais inovadores e técnicas eletroquímicas altamente sensíveis para detecção do antígeno HopQ da H. pylori em baixas concentrações em amostras de saliva em 15 minutos. Dessa forma, é possível vislumbrar uma alternativa para o diagnóstico não- invasivo e precoce da infecção, essencial para prevenção do desenvolvimento de doenças mais graves, como o câncer. Mais estudos são necessários para validar a aplicação do biossensor em um contexto clínico