Exposição ao ácido perfluorooctanoico (PFOA) prejudica a migração de células da crista neural do tronco em embriões de Gallus gallus

Abstract

Resumo : A crista neural (CN) é uma população celular exclusiva dos vertebrados, caracterizada por sua pluripotência, grande capacidade migratória e proliferativa. Essas características permitem que a CN origine várias estruturas no organismo embrionário. Sabe-se que muitos poluentes podem influenciar negativamente os processos celulares durante o desenvolvimento, porém, estudos sobre os efeitos de contaminantes na migração das células da crista neural (CCN) são escassos. Um poluente ambiental que se destaca é o ácido perfluorooctanoico (PFOA), uma substância antropogênica que apresenta persistência no meio ambiente e potencial de bioacumulação como agravantes a sua exposição. Seus efeitos tóxicos são vastos,podendo ocasionar toxicidade do desenvolvimento, além de possuir potencial teratogênico. Contudo, até o momento, a literatura não descreve o efeito desse contaminante sobre as CCN do tronco. Sendo assim, o presente estudo avaliou os efeitos do PFOA sobre as CCN do tronco migratórias em embriões de Gallus gallus. Para isso, foi injetada na câmara de ar de ovos embrionados de galinha uma solução salina (controle) ou PFOA na concentração de 5 ng.ml-1, a qual mimetiza uma exposição pré-natal real. Os ovos foram incubados por cerca de 48-52h, para obtenção de embriões no estádio 15HH. Os embriões foram emblocados em solução de gelatina e sacarose e, então, a região do tronco foi cortada em 100 µm em vibrátomo. Os cortes foram submetidos à técnica de Free Floating para imunofluorescência, utilizando o anticorpo (IgM) anti- HNK-1 para observação das CCN. As lâminas foram montadas, a captura das imagens foi realizada em microscópio de varredura a laser confocal e analisadas com o auxílio do software ImageJ Fiji. Com os dados obtidos, o software GraphPad Prism 9 foi utilizado a fim de avaliar diferenças estatisticamente significativas entre embriões controle e expostos ao PFOA, sendo realizado teste t de Student para a intensidade de fluorescência. Observou-se que os embriões expostos ao PFOA apresentaram redução na migração de CCN em comparação aos embriões controle, indicando citotoxicidade desse composto sobre essa população celular. Desse modo, podemos concluir que a exposição ao PFOA altera o processo de migração das CCN do tronco em embriões de Gallus gallus no estádio 15HH