Análise FTIR da saliva de pacientes com desenvolvimento de DECH após transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas

Abstract

Resumo: A saliva é um biofluido complexo composto por água, íons inorgânicos, proteínas (imunoglobulinas e enzimas), hormônios, muco, ureia e ácido úrico e por isso se torna alvo de diversas pesquisas, principalmente pela coleta simples e não invasiva. Biomarcadores salivares já são utilizados para diagnósticos, prevenção e monitoramento de várias doenças. O transplante de células-tronco hematopoiéticas alogênico (TCTH - alo) é utilizado tratamento para uma vasta gama de doenças hematológicas. Entretanto, a Doença do Enxerto Contra o Hospedeiro (DECH) é o maior efeito adverso deste tratamento, sendo a principal causa de morbidade e mortalidade observadas após o TCTH - alo. Visando a necessidade de novas terapias para o controle da DECH e compreender a resposta do enxerto ao hospedeiro e evitar imunossupressão, o estudo das vias metabólicas estão se destacando, pelas necessidades energéticas das células imunes. A espectroscopia FTIR se destaca pela eficácia na análise de amostras biológicas. Desta forma, o objetivo deste estudo foi utilizar a técnica de FTIR para analisar biomarcadores salivares de pacientes pós TCTH – alo que desenvolveram DECH, a fim de identificar alterações que possam favorecer o diagnóstico desta complicação. Os resultados deste estudo mostram uma diminuição proteica em pacientes com DECH quando comparados ao grupo controle. Observou-se bandas comuns com os achados em doenças autoimunes, como psoríase, esclerose múltipla, doença inflamatória intestinal, doença de Crohn e diabetes, que pode estar relacionado com as semelhanças de células envolvidas e manifestações clínicas, o que se mostra um fator importante para o entendimento da DECH. Além disso, os grupos com DECH apresentaram menor absorção em bandas correspondentes a IFN-? (1,049 cm-1; 1,060 cm-1; 1,047 cm-1 e 1,054 cm-1), que desempenha um papel crucial no sistema imune, evidenciando um fator de imunossupressão nos pacientes. Este estudo foi o primeiro que se sabe na literatura acadêmica utilizando a espectroscopia FTIR para análise salivar de DECH. Os resultados encontrados mostram-se promissores na busca de biomarcadores para a DECH, auxiliando no diagnóstico desta doença, bem como no tratamento e diminuição da morbidade e mortalidade.

Abstract: Saliva is a complex biofluid composed of water, inorganic ions, proteins (immunoglobulins and enzymes), hormones, mucus, urea, and uric acid, making it the focus of numerous research efforts, primarily due to its simple and non-invasive collection. Salivary biomarkers are already employed in the diagnosis, prevention, and monitoring of various diseases. Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation (allo-HSCT) is utilized as a treatment for a wide range of hematologic disorders. However, Graft-versus-Host Disease (GVHD) is the major adverse effect of this treatment, being the primary cause of morbidity and mortality observed after allo- HSCT. Recognizing the need for new therapies to control GVHD, understand the graft- versus-host response, and avoid immunosuppression, the study of metabolic pathways is gaining prominence due to the energy requirements of immune cells. Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) stands out for its effectiveness in analyzing biological samples. Thus, the objective of this study was to employ FTIR to analyse salivary biomarkers in patients post-allo-HSCT who developed GVHD, aiming to identify alterations that facilitate the diagnosis of this complication. The results of this study indicate a decrease in protein content in patients with GVHD compared to the control group. Common bands were observed with findings in autoimmune diseases such as psoriasis, multiple sclerosis, inflammatory bowel disease, Crohn's disease, and diabetes, which may be related to similarities in involved cells and clinical manifestations, proving to be crucial for understanding GVHD. Additionally, the GVHD groups showed reduced absorption in bands corresponding to IFN-? (1,049 cm-1; 1,060 cm-1; 1,047 cm-1 and 1,054 cm- 1), a crucial player in the immune system, indicating an immunosuppressive factor in patients. This study represents the first documented instance in academic literature using FTIR spectroscopy for the salivary analysis of GVHD. The findings are promising in the quest for biomarkers for GVHD, aiding in the diagnosis of this disease, as well as in treatment and the reduction of morbidity and mortality.