Produção e avaliação de anticorpos IGY contra Sars-Cov-2 produzidos em galinhas

Abstract

Resumo: Em março de 2020 a pandemia global causada pelo agente etiológico coronavírus da 2 (SARS-CoV2), cuja doença é denominada COVID-19, foi declarada, com grande número de casos e óbitos pelo mundo durante os últimos anos. O aumento rápido de casos confirmados faz com que a prevenção, controle e estratégias terapêuticas de COVID-19 sejam emergentes. Visando contribuir para o controle da pandemia e desenvolver métodos efetivos de diagnóstico e terapêuticos para a COVID-19, esse trabalho busca produzir anticorpos IgY a partir de peptídeos antigênicos que gerem anticorpos de alta avidez. Foram sintetizados com base na proteína S e N do SARS-CoV-2, para avaliar a produção de anticorpos IgY em ovos de galinhas e potencial de neutralização viral e imunoterápicos. Os animais foram imunizados, por via intramuscular, sendo três imunizações quinzenais idênticas. Os anticorpos foram purificados por precipitação em sulfato de sódio. A avaliação da produção dos anticorpos específicos foi realizada por teste imunoenzimático (ELISA) indireto. E a avaliação do potencial neutralizante dos anticorpos foi realizada com pseudovírus da proteína S do SARS-CoV-2 que não apresentam capacidade de replicação. Dos cinco grupos avaliados o peptídeo 203 foi o que apresentou resultados de neutralização de 38% e 42%, na quinta e sexta semana de experimento, respectivamente. A avaliação da cinética de produção e avidez dos anticorpos foi realizada por ELISA indireto. Os anticorpos dos grupos 132, 309 e 366 apresentaram anticorpos de avidez entre 60% e 100% em todos os períodos avaliados. Palavras-chaves: Anticorpos IgY. SARS-CoV-2. Avidez. Peptídeos.

Abstract: In March 2020, the pandemic caused by the SARS-CoV2, called COVID- 19 was delcared, with a large number of cases and deaths around the world in recent years. The rapid increase of cases makes the prevention, control and therapeutic strategies of COVID-19 necessary. Aiming to contribute to the control of the pandemic and to develop effective diagnostic and therapeutic methods for COVID-19, this work aimed to select for antigenic peptides that have high avidity for application in viral neutralization and immunotherapeutic protocols. The antigens were synthesized based on Spike protein and nucleocapsid protein, from SARS-CoV-2, to evaluate the production of IgY in chickens. The animals were immunized intramuscularly, with three identical immunizations. The antibodies were purified by sodium sulfate preciptation. The evaluation of the production was performed by indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). And the evaluation of the neutralizing antibodies of SARS-CoV-2 was carried out with pseudoviruses that do not have the ability to replicate. Of the five groups gathered, peptide 203 was the one that presented neutralization results of 38% and 42%, in the fifth and sixth week of the experiment, respectively. The avidity index of the peptides ranges from 60 to 85%. The evaluation of the kinetic production of the works was performed by indirect ELISA. Groups 132, 309 and 366 showed high avidity antibodies in all periods. Keywords: IgY antibodies. SARS-CoV-2. Avidity. Peptide.