Estudo morfoanatômico, fitoquímico e ensaios biológicos das folhas e galhos de Symplocos tetrandra Mart. (Symplocaceae)
Resumo
Resumo: A família Symplocaceae possui 406 espécies aceitas, distribuídas em diversos continentes e representada por gênero único, o Symplocos Jacq. No Brasil, o gênero está localizado na Mata Atlântica e cerrado. Estudos demonstraram potencial antimicrobiano, antitumoral e antiviral do gênero e presença de moléculas que apresentam bioatividade como flavonoides, terpenos e saponinas. O presente trabalho teve como objetivo realizar o estudo morfoanatômico, fitoquímico e biológico das folhas e galhos de Symplocos tetrandra Mart. Para o estudo morfoanatômico foram realizados cortes paradérmicos e transversais, observados sob microscopia de luz e eletrônica de varredura, e utilizados reagentes de identificação qualitativa de compostos. Foram constatadas estruturas como osteoesclereídes, cristais prismáticos, drusas e estômatos paracítico que reforçam a classificação taxonômica e ajudam na identificação da espécie. O estudo fitoquímico consistiu no preparo dos extratos etanólicos brutos e frações hexano, clorofórmio, acetato de etila e remanescente das folhas e galhos para pesquisa de metabólitos presentes na planta, para esse fim foi realizado o perfil fitoquímico e a cromatografia em camada delgada, em que se utilizou diferentes tipos de reagentes e reveladores para caracterizar compostos. Foi descoberto a presença de terpenos, flavonoides, cumarinas, saponinas e aminogrupo. Os ensaios biológicos foram divididos em pesquisa da capacidade antioxidante, toxicidade e atividade antimicrobiana. Para o antioxidante foram realizados o teor de fenólicos totais, flavonoides totais, radical DPPH e fosfomolibdênio, com as amostras dos extratos bruto e frações na concentração de 200 ?g/mL em metanol. Os ensaios de fenólicos e flavonoides totais foram realizados curvas de calibração, com o ácido gálico e a quercetina, respectivamente, em que os resultados foram expressos em equivalentes de ácido gálico e quercetina. O ensaio do radical DPPH foi realizado utilizando a curva padrão de trolox com os resultados em equivalente de trolox, e o fosfomolibdênio que utilizou o controle ácido ascórbico para os cálculos da porcentagem equivalente de ácido ascórbico. As amostras apresentaram um potencial antioxidante com destaque a fração clorofórmio dos galhos de S. tetrandra, por apresentar valores elevados nos ensaios conduzidos. O teste de toxicidade foi realizado seguindo o modelo com Artemia salina utilizando os extratos brutos e frações, os resultados foram determinados com a contagem de mortos, para o cálculo de CL50 pelo programa estatístico IBM SPSS por meio do método Probitos, sendo os valores superiores a 1000 ?g/mL, com as amostras classificadas como não tóxicas. A atividade antimicrobiana foi realizada pelo método da determinação da concentração inibitória mínima por microdiluição seriada em caldo, as amostras dos extratos brutos não demonstraram inibição do crescimento de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis, pela presença de turbidez no meio. A espécie S. tetrandra apresenta potencial para futuras pesquisas fitoquímicas, biológicas e farmacológicas, pois foram levantados dados promissores para o conhecimento científico, ajudando a elucidar uma espécie com pouco estudo. Abstract: The family Symplocaceae has 406 species recognized, distributed in several continents and represented by a sole genus, the Symplocos Jacq. In Brazil, the genus is mainly located in Mata Atlântica rain forest and Cerrado. Studies have also shown the genus to have antimicrobial, antitumor and antiviral potential, as well as the presence of molecules with biological activities such as flavonoids, terpenes and saponins. The purpose of the paper was to analyze the morphoanatomy, phytochemistry and biological tests of the leaves and twigs of Symplocos tetrandra Mart. For the morphoanatomical study, paradermal and transversal sections cuts were observed under a light and scanning electron microscopy and qualitative compound identification reagents were used. It was possible to verify structures such as osteosclereids, prismatic crystals, druses and paracytic stomata which reinforces the taxonomic classification and help identify the species. The phytochemical study was done by preparing the crude ethanolic extract and hexane, chloroform, ethyl acetate and remaining fractions of the leaves and twigs to research for metabolites present in the plant. To this end, the phytochemical outline and thin layer chromatography were performed, using different types of reagents and developers to characterize compounds. The presence of terpenes, steroids, flavonoids, coumarins, saponins and amino groups was discovered. The biological tests were divided into antioxidant capacity, toxicity and antimicrobial activity. For antioxidants, the content of total phenolics, total flavonoids, DPPH radical and phosphomolybdenum were measured using samples of the crude extracts and fractions at a concentration of 200 ?g/mL in methanol. The total phenolic and flavonoid assays were carried out using calibration curves, employing gallic acid and quercetin, respectively, and the results were expressed as gallic acid and quercetin equivalents. For the DPPH radical the assay was carried out with the standard trolox curve with the results in trolox equivalent and percentage, and the phosphomolybdenum assay was performed using the ascorbic acid control to calculate the equivalent percentage of ascorbic acid. The samples showed antioxidant potential, especially the chloroform fraction in S. tetrandra twigs, which showed high values in the tests conducted. The toxicity test was carried out using the Artemia salina model, with crude extracts and fractions. The results were determined by counting the dead and calculating the CL50 through the IBM SPSS statistical program using the Probitos method, with values above 1000 ?g/mL being classified as non-toxic. Antimicrobial activity was determined using the minimum inhibitory concentration method by serial microdilution in broth. Samples of the crude extracts did not inhibit the growth of Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis, due to the presence of turbidity in the broth. The S. tetrandra species has potential for future phytochemical, biological and pharmacological research, as promising data was collected for scientific knowledge, helping to elucidate a species with very few studies.
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