Isolamento e caracterização do operon glnAntrBC de Herbaspirillum seropedicae Z78

Abstract

Resumo: Cinco plasmídeos recombinantes foram isolados, a partir de um banco de genes de Herbaspirilum seropedicae, por complementação genética de um mutante ntrC de E. coli. Estes plasmídeos, denominados pKRT1 a pKRT5, além de restaurarem a capacidade de utilização de L-arginina pelo mutante ntrC de E. coli ET8556, também foram responsáveis pela expressão da atividade da nitrogenase em mutantes ntrC de A. brasilense, estirpes EPS e FP9. O plasmídeo recombinante pKRTi, escolhido para um estudo mais detalhado da sua estrutura, apresenta um inserto de DMA de H. seropodicae de 22,5 kpb. Este inserto contém sítios de restrição para as endonucleases EcoR I, Hind III, Xho I, Bgl II e Pst I, não tendo sido clivado na presença de Bamh. A presença do gene ntrC no pKRTi foi confirmada por estudos de hibridização, que revelaram também a presença dos genes glnA e ntrB. Os resultados obtidos indicam que a organização desses genes em Horbaspirillum seropedicae é contígua, como aquela observada em K. pnoumoniae e A. vinolandii (54, 170).