Extração, purificação e caracterização parcial de uma fração glicoproteica isolada do líquen Dictyonema glabratum (Sprengel) D. Hawksworth

Abstract

Resumo: Uma fração glicoproteica, contendo 14% de carboidrato, foi obtida do líquen Dictyonema glabratum através de extração aquosa em tampão fosfato, seguida por fracionamento com sulfato de amónio, na faixa de 50-70% de saturação, e purificação por métodos cromatográficos em colunas de filtração em gel (Sepharose CL-6B) e troca iônica (DEAE-Sepharose). A homogeneidade desta fração foi analisada por filtração em gel em Sepharose CL-2B e por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de SDS, mostrando que se trata de um composto homogêneo com massa molecular acima de 1.000 KDa. O componente proteico apresentou alto teor de glicina e, em relação aos aminoácidos envolvidos em ligações glicosídicas, apenas serina e treonina foram detectados, enquanto que a porção carboidrato consistiu principalmente de resíduos de manose, xilose e arabinose. Ensaio de hemaglutinação com eritrócitos humanos, apontou atividade apenas no extrato bruto e fração precipitada com sulfato de amónio, não havendo atividade na fração purificada pelos procedimentos cromatográficos.