| dc.description.abstract | Resumo : A esporotricose é uma infecção que acomete animais, principalmente felinos, e humanos. Essa micose apresenta como sinais clínicos, em felinos, lesões cutâneas se disseminando principalmente na região nasal e na face, já em humanos ocorre a formação de lesões cutâneas fixas. A infecção é causada pelo fungo Sporothrix spp. que apresenta dimorfismo e características macroscópicas variadas, pois é um gênero que apresenta inúmeras espécies. O presente trabalho teve como objetivo principal, realizar a caracterização fenotípica e genotípica dos três isolados fúngicos de amostras coletadas de felinos que apresentaram diagnóstico clínico sugestivo para esporotricose, além disso são discutidos os principais desafios da identificação laboratorial desse agente. Duas amostras foram coletadas na cidade de Guaíra - PR e a terceira em Palotina - PR. Para a caracterização fenotípica, os fungos foram cultivados em ágar micobiótico, para observação das características das colônias e a micromorfologia foi realizada após microcultivo em lâmina. A identificação molecular foi realizada para uma das amostras, após extração do DNA utilizando kit Plant/Fungi DNA Isolation kit (Norgen), por meio do sequenciamento da região do espaçador transcrito interno da região do gene ribossomal rDNA ITS1-4. Todos os isolados apresentaram colônias secas, sendo duas de coloração creme e um de coloração acastanhada. Nenhum dos isolados apresentou dimorfismo pela conversão da forma micelial para levedura, utilizando ágar micobiótico, nas temperaturas de 25 e 37°C. Porém, quando as amostras foram cultivadas, em caldo BD e posteriormente semeadas em ágar micobiótico, foi possível observar a formação de colônias isoladas, ainda com coloração creme e aspecto seco. Não foi possível confirmar a ocorrência da transição micélio-levedura apenas com a análise macromorfológica e novos testes com outros meios de cultura deverão ser realizados, além da micromorfologia da cultura. Com a análise microscópica foi possível confirmar o gênero, pela observação de hifas finas e presença de conídios ovalados, organizados no topo de conidióforos, característicos do gênero. Para o sucesso na amplificação por PCR, foi necessário realizar uma precipitação com acetato de potássio 3M, para eliminar possíveis contaminantes e concentrar as amostras. O sequenciamento resultou em uma sequência de apenas 181 pb, comparando com o tamanho do amplicon, que foi de aproximadamente 600 pb o que não interferiu no resultado da comparação com sequências depositadas no GenBank. A amostra identificada apresentou 93% de similaridade com Sporothrix brasiliensis, espécie mais comumente isolada no Brasil. Os resultados apresentados nesse trabalho são importantes para contribuir com estudos epidemiológicos da esporotricose na região do Oeste do Paraná e para a conduta terapêutica dos animais, mas será igualmente útil como um guia para caracterização microbiológica e molecular do agente fúngico para futuros trabalhos. | pt_BR |
