Efeitos da fototerapia com rosa bengala em células de melanoma humano com diferentes níveis de atividade da GTPase RhoA

Abstract

Resumo: O melanoma tem origem nos melanócitos e é um câncer extremamente agressivo e com alto índice de metástase. Ao contrário do câncer de pele nãomelanoma, essa neoplasia é bastante resistente a um tipo de tratamento conhecido como terapia fotodinâmica (PDT), na qual existe a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS), principalmente o oxigênio molecular singlete (1O2) pela ação da luz sobre um composto fotossensibilizador. Por outro lado, o desenvolvimento do melanoma tem sido associado com a radiação UV. Quando células são expostas a raios UVA (320 - 400 nm), existe a geração de ROS e 1O2. Anteriormente, um estudo mostrou que a atividade da RhoA, uma GTPase envolvida em várias respostas celulares, agindo principalmente sobre o citoesqueleto celular e a polimerização de fibras de estresse, resulta em respostas um pouco diferentes quando células de melanoma humano são expostas à radiação UV. Sendo assim, objetiva-se avaliar os efeitos do 1O2 gerado por PDT com Rosa Bengala em células da linhagem de melanoma humano MeWo com diferentes níveis de atividade de RhoA. Foi investigada a resposta celular em termos de sobrevivência, alterações de citoesqueleto de actina e motilidade imediatamente após PDT e após um período de recuperação. Os resultados mostraram que uma atividade aumentada ou diminuída de RhoA não favoreceu a sobrevivência celular ou a motilidade, entretanto, pequenas diferenças foram observadas em relação a aspectos morfológicos e do citoesqueleto de actina, indicando que as células com menor atividade de RhoA aparentemente apresentam um fenótipo mais parecido com células resistentes à PDT.

Abstract: Melanoma originates from melanocytes and is an extremely aggressive cancer with a high rate of metastasis. Unlike non-melanoma skin cancer, this neoplasm is quite resistant to a type of treatment known as photodynamic therapy (PDT), in which there is the generation of reactive species of oxygen (ROS), mainly singlet molecular oxygen (1O2) by the action of light on a photosensitizing compound. On the other hand, the development of melanoma has been associated with UV radiation. When cells are exposed to UVA rays (320 - 400 nm), ROS and 1O2 are generated. Previously, a study has shown that the activity of RhoA, a GTPase involved in various cellular responses, acting mainly on the cellular cytoskeleton and the polymerization of stress fibers, results in slightly different responses when human melanoma cells are exposed to UV radiation. Therefore, the objective is to evaluate the effects of 1O2 generated by PDT with Rose Bengal on cells of the human melanoma lineage MeWo with different levels of RhoA activity. The cellular response in terms of survival, changes in actin cytoskeleton and motility were investigated immediately after PDT and after a recovery period. The results showed that the increased or decreased RhoA activity did not favor cell survival or motility, however, small differences were observed in relation to morphological aspects and the actin cytoskeleton, indicating that cells with lower RhoA activity apparently have a phenotype like PDT resistant cells.