Avaliação dos efeitos renoprotetores do ácido alfa-lipoico em modelos animal de nefrectomia 5/6 e dos efeitos do indoxil sulfato em células mesangiais

Abstract

Resumo: A úlcera gástrica é um problema de saúde pública mundial, caracterizada por extensas lesões na mucosa do estômago e/ou esôfago que podem se estender por todas as camadas do órgão, causando sérias complicações como sangramentos e perfurações que requerem hospitalização do paciente e intervenção cirúrgica. Como principais causas da úlcera gástrica temos o uso de anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs), que diminuem a produção de muco-bicarbonato gastroprotetor, e a infecção pela bactéria Helicobacter pylori. Além da erradicação da H. pylori, o tratamento convencional visa a inibição da produção de ácido clorídrico pelo uso dos inibidores da bomba de prótons (e.g. omeprazol), ou de antagonistas de receptores H2 da histamina (e.g. ranitidina). Contudo, estudos demonstram que a inibição da secreção ácida gástrica está associada ao aumento do risco de desenvolvimento de diversas doenças como osteoporose, infecções intestinais e até doença renal crônica. Além da secreção ácida gástrica, a ulcerogênese é um processo complexo que também envolve o fluxo sanguíneo. Os sistemas endotelinérgico e da via do óxido nítrico modulam a microcirculação bem como a inflamação e o estresse oxidativo na mucosa gástrica. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito gastroprotetor e cicatrizante de drogas vasoativas, mais especificamente da bosentana e da sildenafila, em modelos de úlcera gástrica aguda e crônica. A administração oral de bosentana (antagonista dual de receptores ETA e ETB) e da sildenafila (inibidor da fosfodiesterase 5), isoladas ou em associação foram investigadas no modelo de úlcera aguda induzida por isquemia-reperfusão. O efeito cicatrizante da monoterapia com a bosentana foi investigada no modelo de úlcera crônica induzida por ácido acético. Por fim, o modelo de ligadura do piloro foi utilizado para investigar o efeito da bosentana na secreção ácida gástrica. Na úlcera aguda por IR, o pré-tratamento com bosentana, sildenafila ou a associação de baixas doses de ambos reduziram a área ulcerada, impediram a depleção de muco e das defesas antioxidantes no tecido gástrico. Complementarmente, esse pré-tratamento reduziu a infiltração de neutrófilos, importante marcador de inflamação tecidual. No modelo de úlcera crônica induzida por ácido acético foi constatado um aumento na expressão de receptores ETA e ETB na área ulcerada dos animais do grupo veículo comparado com animais naïve. O tratamento com a bosentana por cinco dias acelerou a cicatrização das úlceras crônicas, aumentou o conteúdo de mucina e a proliferação de células epiteliais da mucosa gástrica, reduziu a infiltração de neutrófilos e os níveis de citocinas inflamatórias, como fator de necrose tumoral-alfa e interleucina 1 beta. Os parâmetros plasmáticos da função renal e hepática não foram alterados pelo tratamento subcrônico com a bosentana. A partir dos resultados do modelo agudo, conclui-se que o pré-tratamento com bosentana e sildenafila ou a associação de baixas doses dos fármacos exibe efeito gastroprotetor, e no modelo de úlcera crônica, o pós-tratamento com bosentana induziu a cicatrização de úlceras crônicas, sem modificar a secreção ácida gástrica. Nossos resultados reforçam a tendência mundial do reposicionamento de fármacos (uso off label), e de maneira especial este estudo demonstra que outras vias podem ser exploradas como adjuvantes no tratamento de úlceras gástricas, contornar os possíveis efeitos adversos do tratamento convencional. Palavras chaves: Úlcera gástrica, sildenafila, bosentana, endotelina, inflamação, estresse oxidativo.

Abstract: Gastric ulcer is a worldwide public health problem, characterized by extensive lesions in the mucosa of the stomach and / or esophagus that can extend through all layers of the organ, causing serious complications such as bleeding and perforations that require hospitalization and surgical intervention. The main causes of gastric ulcer are the use of non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), which decrease the production of gastroprotective mucus-bicarbonate, and infection by the bacterium Helicobacter pylori. In addition to the eradication of H. pylori, conventional treatment aims to inhibit the production of hydrochloric acid by the use of proton pump inhibitors (e.g. omeprazole), or histamine H2 receptor antagonists (e.g. ranitidine). However, studies show that inhibition of gastric acid secretion is associated with an increased risk of developing several diseases such as osteoporosis, intestinal infections and even chronic kidney disease. In addition to gastric acid secretion, ulcerogenesis is a complex process that also involves blood flow. The endothelinergic and nitric oxide pathway systems modulate microcirculation as well as inflammation and oxidative stress in the gastric mucosa. Thus, the objective of this work was to evaluate the gastroprotective and healing effect of vasoactive drugs, more specifically bosentan and sildenafil, in models of acute and chronic gastric ulcers. Oral administration of bosentan (dual antagonist of ETA and ETB receptors) and sildenafil (phosphodiesterase 5 inhibitor), either alone or in combination, were investigated in the ischemia-reperfusion-induced acute ulcer model. The healing effect of bosentan monotherapy was investigated in the acetic acid-induced chronic ulcer model. Finally, the pyloric ligation model was used to investigate the effect of bosentan on gastric acid secretion. In acute IR ulcers, pretreatment with bosentan, sildenafil or the combination of low doses of both reduced the ulcerated area, prevented mucus depletion and antioxidant defenses in gastric tissue. In addition, this pre-treatment reduced the infiltration of neutrophils, an important marker of tissue inflammation. In the acetic acidinduced chronic ulcer model, an increase in the expression of ETA and ETB receptors was found in the ulcerated area of animals in the vehicle group compared with naïve animals. Treatment with bosentan for five days accelerated the healing of chronic ulcers, increased mucin content and proliferation of gastric mucosal epithelial cells, reduced neutrophil infiltration and inflammatory cytokine levels, such as alpha-tumor necrosis factor and interleukin 1 beta. Plasma parameters of renal and liver function were not altered by sub-chronic treatment with bosentan. From the results of the acute model, it is concluded that pretreatment with bosentan and sildenafil or the association of low doses of the drugs exhibits a gastroprotective effect, and in the chronic ulcer model, post-treatment with bosentan induced the healing of ulcers. without changing gastric acid secretion. Our results reinforce the worldwide trend of drug repositioning (off label use), and in a special way this study demonstrates that other routes can be explored as adjuvants in the treatment of gastric ulcers, to circumvent the possible adverse effects of conventional treatment. Keywords: Gastric ulcer, sildenafil, bosentan, endothelin, inflammation, oxidative stress.