Caracterização de vesículas extracelulares na interação de células com veneno de Loxosceles intermedia

Abstract

Resumo: O araneismo (envenenamento causado por aranhas) é um problema de saúde pública no Brasil. Na região sul e sudeste as principias notificações do loxocelismo são ocasionadas pelas espécies predominantes L. intermedia, L. gaucho e L. laeta, e, de acordo com os dados da Secretaria de Saúde de Paraná, em 2017 fàram notificados mias de 4000 casos de loxocelismo. O envenenamento em humanos pode ser caracterizado por duas variantes clínicas: o loxoscelismo cutâneo e o loxoscelismo sistêmico. Inúmeros protocolos para o tratamento do envenenamento loxoscélico já foram propostos e testados, sendo a soroterapia o único tratamento específico apontado com maior potencial de neutralização na ação do veneno. Dentro do contexto do envenenamento não tem se descrito o papel de vesículas extracelulares como produto ou indutor de efeitos citotóxicos. Neste trabalho avaliamos a liberação de vesículas extracelulares (Exosomas ou Microvesículas) decorrentes do contato entre veneno\toxinas com as células. Nas três diferentes linhagens celulares testadas foi possível detectar a produção de vesículas extracelulares, e as mesmas foram induzidas de maneira dose dependentes em relação às concentrações de veneno empregadas. Foram demonstrados ainda efeitos biológicos dessas vesículas e a inibição da produção das mesmas pela adição de anticorpos monoclonais específicos para toxinas loxoscelicas. Os achados aqui abrem uma nova perspectiva para o entendimento dos possíveis mecanismos de interações celulares, propagadores dos efeitos citotóxicos dos venenos Loxoscelicos.

Abstract: The spider bites (Envenomation) is a problem in public health in Brazil, in the south and southeast region has a main notification of the loxoscelism caused by the predominant species L. intermedia, L. gaucho and L. laeta, according to figures from the secretary of health of Paraná were notified in 2017 approximately 4000 cases by loxoscelism. Envenomation in humans can be characterized by two clinical variants: cutaneous loxoscelism and systemic loxoscelism. Numerous protocols for the treatment of loxoscelism have been proposed and tested. Serotherapy being the only specific treatment indicated with greater potential for neutralization in the action of venom. Within the context of poisoning the role of extracellular vesicles as a product or as an inducer has not been described. In this work, we evaluated the release of extracellular vesicles (Exosomes or Microvesicles) arising from the contact between poison and toxins with the cells. In the three different cell lines tested it was possible to detect the production of extracellular vesicles, and they were induced in a dose-dependent manner in relation to the concentrations of venom employed. Biological effects of these vesicles and the inhibition of their products have also been demonstrated by the addition of monoclonal antibodies specific for Loxoscelicas toxins. The findings here open up a new perspective for the understanding of the possible mechanisms of cellular interactions, which propagate the cytotoxic effects of Loxoscelism venoms.