Aspectos da adesão de aeromonas a linhagens celulares imortalizadas

Abstract

Resumo: As 42 estirpes de Aeromonas foram capazes de aderir sobre células das linhagens HeLa e HRT-1, mas diferem em relação ao número de bactérias aderidas às células e número de células infectadas. A maioria das estirpes (33 em HeLa e 36 em HRT-18) apresentou baixo nível de adesão (<10 bactéria/célula). Foram observados dois perfis de adesão, agregativo e difuso, este observado em 28 das 42 estirpes. Para todas as estirpes o mesmo perfil de adesão foi observado em ambas as linhagens celulares. As estirpes variaram quanto à capacidade de causar efeitos citotóxicos, e também em relação ao efeito provocado em células das linhagens HRT-18 e HeLa, sendo esta última mais sensível aos produtos tóxicos gerados por Aeromonas. As alterações celulares variaram de arredondamento discreto, vacuolização, formação de blebs a desadesão celular. Aeromonas com genótipos de virulência distintos provocaram efeitos citotóxicos similares, sugerindo que não há uma relação direta entre os genes de virulência identificados e citotoxicidade nas condições de estudo. Entre as 8 estirpes para as quais testes adicionais foram realizados apenas AH 297M provocou hemaglutinação, sugerindo que essas bactérias diferem em relação às moléculas associadas com adesão. Ensaios de competição com carboidratos, tratamento com tripsina e metaperiodato de sódio causaram redução na adesão de uma ou mais estirpes, sugerindo que essas bactérias provavelmente apresentam adesinas distintas que reconhecem receptores diferentes em HeLa e HRT-18. Seis das 8 estirpes de Aeromonas aderiram ao Matrigel, reforçando a sugestão de que as estirpes apresentam diferentes tipos de moléculas de adesão na sua superfície.

Abstract: Forty two strains of Aeromonas were able to adhere on cells of HeLa and HRT-18 lineages, but differed in relation to the number of bacteria attached to the cells and the number of infected cells. Most strains (33 in HeLa and 36 in HRT- 18) showed low level of adherence (<10 bacteria/cell). Two patterns of adhesion were observed, aggregative and diffuse, the last was observed in 28 of the 42 strains. For all strains the same pattern of adhesion was observed in both cell lines. Strains varied in their ability to cause cytotoxic effects, and also in relation to the effect caused in HRT-18 and HeLa cells, the last lineage was more sensitive to the toxic products produced by Aeromonas. Cellular changes ranged from slight rounding, vacuolization, bleb formation and cell detachment. Aeromonas with different virulence genotypes caused similar cytotoxic effects, suggesting that there was not a direct relationship between the virulence genes identified and cytotoxicity under the study conditions. Among the 8 strains for which additional tests were performed, only AH 297M caused hemagglutination, suggesting that these bacteria differ with respect to molecules associated with adhesion. Competition assays with carbohydrate, treatment with trypsin and sodium metaperiodate caused reduction in the adhesion of one or more strains, suggesting that these bacteria probably have different adhesins that recognize different receptors in HeLa and HRT- 18 cells. Six of the eight strains of Aeromonas adhered to Matrigel, strengthening the suggestion that these strains exhibit different adhesion molecules on their surface.