Estudo de polimorfismos do gene COX7A2L associados à doença de Alzheimer

Abstract

Resumo : A Doença de Alzheimer (DA), demência neurodegenerativa de maior ocorrência na população mundial, caracteriza-se pela perda de memória seguida de disfunções cognitivas. Sendo uma demência complexa, apresenta atualmente duas Hipóteses possíveis. De acordo com a Hipótese da Cascata Amilóide, o acúmulo de proteínas ß-amilóide eleva a toxicidade, rompe a homeostase do cálcio e induz estresse oxidativo promovendo a disfunção mitocondrial. Já a Hipótese da Cascata Mitocondrial, propõe que esta disfunção geraria espécies reativas de oxigênio (EROs) acumulando mutações no DNA mitocondrial (DNAmt) aumentando progressivamente sua disfunção. Um novo mecanismo para modulação da cadeia respiratória mitocondrial foi proposto com a descoberta do gene nuclear COX7A2L (2p21) como responsável por codificar uma proteína chaperona que ajuda na montagem de supercomplexos (SC) mitocondriais (respirossoma e SC CIII+CIV). Sabendo que alterações na formação de SC pode contribuir na Hipótese da Cascata Mitocondrial, o presente estudo propõe identificar polimorfismos existentes no gene COX7A2L associados a DA. Utilizaram-se amostras de pacientes com DA do Hospital das Clínicas da UFPR e do Instituto de Neurologia de Curitiba e amostras de idosos saudáveis como controle (CI). Foram utilizados três pares de primers para os éxons 2, 3 e 4 e eletroforese em gel de poliacrilamida SSCP para a identificação de polimorfismos de nucleotídeo único (SNP). Para todos os exons foram apresentados padrões diferentes de bandas, COX2 (exon 2) com dois padrões, com diferença significativa entre DA e e uma amostra CI, e o outro padrão em apenas um CI. Em COX4 (exon 4), apenas CI (p=0,0001). Em COX3 (exon 3) três padrões foram observados, sendo um dos padrões encontrado em uma amostra DA um CI apresentou padrão diferente. Uma amostra de COX2 que apresentou o padrão menos frequente e as amostras com diferentes padrões de COX3 e COX4 foram sequenciadas. Obtivemos resultado apenas de COX4, encontrando um SNP já descrito (rs79591809), de baixa frequência. Concluímos que pode haver associação com DA no éxon 2, porém precisamos sequenciar novamente as amostras de COX2. Para COX3 também deve-se repetir o sequenciamento para identificação de polimorfismo, porém não há associação e para COX4 encontramos um SNP, mas também não há associação.