A influência de fatores de crescimento na cicatrização de feridas cutânea em ratas

Abstract

Resumo: Introdução: A cicatrização é um processo de restauração da integridade física interna e (ou) externa das estruturas do corpo e compreende complexas interações entre células e outros fatores. É um processo dinâmico, complexo, multicelular envolvendo matriz extracelular, citocinas, células sanguíneas e fatores de crescimento. Os fatores de crescimento são proteínas que estimulam e ativam a proliferação celular mediante a ativação da angiogênese, mitogênese, transcrição genética, entre outras reações, ativando e acelerando o processo de cicatrização. Objetivos: Avaliar a evolução macro e microscópica de feridas realizadas no dorso de ratas, com infiltração de fatores de crescimento epitelial e misto; e comparar a evolução do processo cicatricial com a ferida controle, sem infiltração de fator de crescimento. Método: Foram utilizadas 45 ratas Wistar, submetidas a excisões de pele no dorso, após infiltração de fatores de crescimento nas feridas epitelial (F2) e mista (F3). As avaliações macroscópicas com fotografias padronizadas e mensuração da área e as microscópicas foram realizadas no terceiro, no sétimo e no décimo quinto dia do experimento, após a exérese da ferida, e comparadas nos 15 dias do experimento e nos momentos de morte. Para análise microscópica, utilizou-se coloração de Hematoxilina-Eosina para avaliar o processo inflamatório; vimentina, para a avaliação dos vasos e fibroblastose, e coloração de Picro Sirius Red, para avaliar o colágeno. Resultados: Na avaliação macroscópica, o uso de fatores de crescimento proporcionou cicatrização mais rápida e diminuição do tecido de granulação no sétimo e décimo quinto dia; em oposição, a ferida controle, que apresentou tecido de granulação até o décimo quinto dia (80±0,311% de redução na ferida controle vs 83±0,201% na ferida epitelial vs 100% na ferida mista). Na microscopia, nos três momentos do experimento (três, sete e quinze dias), não foram encontradas diferenças significativas entre as três feridas, os resultados foram semelhantes; entretanto, quando comparados os dias de morte em relação a cada tipo de ferida, observou-se resultado favorável para as feridas epiteliais (infiltradas com fator de crescimento epitelial) e mistas (infiltradas com fator de crescimento misto: fator de crescimento vascular, fibroblastos e insulínico) em comparação à ferida controle (entre 3o x 15o dias houve diferença significativa com p<0,001 e na comparação entre 7o x 15o dias também houve diferença significativa, com p=0,002 e p=0,001 para as feridas epiteliais e mistas)resultado com maior numero de fibloblastos angiogenese e colágeno tipo I. Conclusão: A utilização de fatores de crescimento, tanto epitelial como misto, acelera o processo de cicatrização, estimula maior atividade angiogênica, acelera a fibroplasia e maturação do colágeno e consequentemente a maturação da cicatrização. Palavras-chave: Feridas em ratas. Fator de crescimento. Cicatrização.

Abstract: Introduction: Wound healing is a process of restoring the internal physical integrity and (or) of the external body and comprises complex structures and interactions between cells and other factors. It is a dynamic and complex process, involving multistage extracellular matrix, cytokines, blood cells and growth factors. Growth factors are proteins that stimulate and activate cell proliferation through the activation of angiogenesis, mitogenesis, gene transcription, among other reactions, activating and accelerating the healing process. Objective: To assess macro and microscopic evolution of wounds made in the backs of rats with infiltration of epithelial and mixed growth factors; and compare the evolution of the healing process with a control without growth factor infiltration. Method: 45 female Wistar rats were submitted to skin excisions on the backs followed by infiltration of growth factors in the wound epithelial (F2) and mixed (F3). Macroscopic assessments with standardized photographs and measurements of the area and the microscopic were carried out in the third, the seventh and the fifteenth day of the experiment, after excision of the wound. And compared within fifteenth days of the experiment and in times of death. For microscopic analysis, we used hematoxylin-eosin staining was used to evaluate the inflammatory process; vimentin for the evaluation of the vessels and fibroblastose and picrosirius red staining to evaluate the collagen. Results: To macroscopic evaluation, use of growth factors was associated with faster healing and decrease of granulation tissue in the seventh and fifteenth day; in contrast, the wound control showed granulation tissue until the fifteenth day (80±0,311% reduction in wound control vs 83±0,201% in epithelial wound vs 100% in the mixed wound). In microscopy, the three moments of the experiment (three, seven, and fifteen days), there were no significant differences between the three wounds, the results were similars; however when compared to the day of death for each type of wound, there was a favorable outcome for the epithelial wounds (infiltrated with epithelial growth factor) and mixed (infiltrated with mixed growth factor: fibroblast growth factor, fibroblast and insulin) compared to the control wound (between 3 x 15 days was no significant difference, the results were similar, with p<0.001 and the comparison between 7th x 15 days also was no significant difference, p=0.002 and p=0.001 for epithelial and mixed wounds), results with more number of fibroblasts, vessels and collagen type I. Conclusion: The use of growth factors, either epithelial or mixed accelerates the healing process, stimulates more angiogenic activity, fibroplasia and accelerates the maturation of the collagen and thus maturation of the healing process. Keywords: Wounds in rats. Growth factor. Healing.