Análise do número de cópias do gene CCND1 em carcinomas primários de mama

Abstract

Resumo : Segundo o Instituto Nacional do Câncer (INCA) o câncer de mama é o mais comum entre as mulheres e corresponde a 22% dos novos casos de câncer a cada ano. Possui características moleculares e histopatológicas distintas, além de variabilidade genética. Caracteriza-se pelo desenvolvimento anormal de células da mama, cuja elevada multiplicação resulta na formação de tumor. Células cancerosas apresentam alterações na expressão e no número de cópias de diversos genes promovendo a redução ou aumento da expressão de proteínas que contribuem para o estabelecimento e progressão do câncer. No câncer de mama, o gene CCND1, localizado no cromossomo 11q13.3 e envolvido no ciclo celular, apresenta-se amplificado em cerca de 15-20% das pacientes. Neste estudo foi realizada a análise do número de cópias deste gene relacionando os resultados obtidos com os dados clínico histopatológicos com o objetivo principal de avaliar sua influência no processo de metástase. O estudo foi realizado com 102 amostras de pacientes, predominantemente euro-descendentes, provenientes do Hospital Nossa Senhora das Graças. As amostras foram divididas de acordo com a presença (68) ou ausência (34) de metástase em linfonodo axilar. A extração do DNA dos tumores sólidos foi realizada pelo método de fenol-clorofórmio e a análise de alterações do número de cópias por PCR quantitativa em tempo real utilizando o ensaio TaqMan® Copy Number Assays (Life Technologies™). Os dados obtidos foram analisados pelos softwares Copy Caller (Life Technologies™) e GraphPad Prism 5. Na análise do número de cópias do gene em estudo todas as amostras apresentaram ganho, resultado que corrobora a literatura. Para todos os parâmetros clínico histopatológicos analisados não houve diferença significativa entre os grupos de pacientes com e sem metástases. Este estudo sugere que o gene CCND1 está amplificado em pacientes portadoras de carcinoma mamário, porém, não se mostrou um fator predominante no processo metastático.