Obtenção e caracterização de uma estirpe mutante no gene fixN de Herbaspirillum seropedicae

Abstract

Resumo : Herbaspirillum seropedicae é um microrganismo diazotrófico, endofítico que se associa a diversas gramíneas de interesse econômico. O nitrogênio fixado por este organismo pode ser utilizado pela planta hospedeira, por isso é importante entender a fisiologia e genética do processo de fixação biológica de nitrogênio. A citocromo oxidase cbb 3 , codificada pelos genes fixNOQP, é necessária para a respiração microaeróbica em vários organismos e em rizóbios, é essencial para a fixação biológica de nitrogênio. Estirpes mutantes nos genes fixN e fixO de Bradyrhizobium japonicum capazes de produzirem nódulos em soja, não são capazes de fixar nitrogênio, sugerindo que a citocromo cbb3 está envolvida com o transporte de elétrons neste organismo. O operon fixNO QP foi identificado pelo Projeto de Sequênciamento do Genoma do H. seropedicae (G enopar). A identificação da função desta enzima poderá esclarecer a via de transporte de elétrons neste organismo. O transposon EZ:TN , contendo um gene de resistência a tetraciclina, foi inserido no gene fixN do H. seropedicae da estirpe Sm rl por recombinação homóloga, produzindo a estirpe RAMM21. A atividade da nitrogenase deste mutante foi 40-50% da atividade da estirpe selvagem. Este resultado sugere que a citocromo oxidase cbb3 é importante para atividade de nitrogenase máxima em H. seropedicae.