Modulaçao da embriogenese somática em células de cenoura(Daucus carota): Atividade de polissacarídeos contendo xilose e arabinose
Resumo
Resumo : Em virtude do envolvimento de carboidratos na modulação de eventos de importância regulatória para o crescimento e o desenvolvimento vegetal, o presente trabalho propôs analisar o efeito do polissacarídeo obtido a partir do exsudato de Syagrus romanzoffiana (Gerivá) (PN) e de 3 derivados modificados quimicamente sobre a embriogênese somática em células de cenoura {Daucus carota) cultivadas in vitro. O PN foi quimicamente modificado por hidrólise ácida parcial, obtendo-se o polissacarídeo parcialmente hidrolisado (PHPI), degradação controlada de Smith, obtendo-se o polissacarídeo degradado (PDSI) e sulfatação, obtendo-se o polissacarídeo nativo sulfatado (PNS). O PN, o PHPI e o PDSI foram previamente caracterizados quimicamente no Laboratório de química de carboidratos de exsudatos vegetais. Departamento de Bioquímica (UFPR), e apresentaram-se constituídos por xilose, arabinose, ramnose e ácidos urônicos na razão molar de 48:24:20:8, 82:2:8:8 e 85:12:0:3, respectivamente. O PN foi modificado quimicamente através de sulfatação, onde obteve-se um polissacarídeo sulfatado (PNS) (D.S. 0,7), que, após análise em GC-MS (cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massa) apresentou-se constituído por xilose, arabinose e ramnose na razão molar de 51:25:24, além de ácidos urônicos. Após análise em HPSECMALLS (cromatografia de exclusão estérica acoplada a multidetectores), verificou-se a homogeneidade do PNS e a massa molecular média calculada foi de 1,48x10® g.mol'\ Nos testes realizados neste trabalho, foram avaliados os efeitos dos polissacarídeos sobre a formação de embriões somáticos totais, embriões no estádio cotiledonar, plântulas e também sobre ò crescimento, em termos de matéria fresca e seca. Células formadas a partir de tecido de calo crescendo in vitro foram cultivadas na presença do PN e de seus derivados (PNS, PHPI e PDSI) nas concentrações 0,1, 1, 20 e 60 lag.mrV Um aumento significativo (p<0,05) de 68% e 84% sobre o número total de embriões e número de embriões no estádio cotiledonar, respectivamente, foram observados para células crescidas em meio de cultura enriquecido com 60 pg.ml'^ de PDSI. Um aumento de 32% no número de embriões no estádio cotiledonar foi verificado para células crescidas na presença do PN (0,1 pg.ml'^). O número total dè embriões foi reduzido (p<0,05) em 33% e 46%, respectivamente, para células crescidas em meio de cultura contendo PNS na concentração 1 e 20 l^g.mrV A formação de embriões no estádio cotiledonar foi também inibida (em 48%) (p<0,05) na presença de PNS (20 pg.ml'^). Observou-se uma tendência de inibição na formação de plântulas a partir dos embriões somáticos formados na presença de todos os polissacarídeos testados. Porém, esta inibição se mostrou estatisticamente significativa apenas para o PN e o PNS, ambos na concentração de 0,1 |j.g.mr\ onde ocorreu uma diminuição de 86% e 77% no número de plântulas. A presença dos polissacarídeos no meio de cultura, em quaisquer das concentrações testadas, não causou alteração estatisticamente significativa na acumulação de matéria fresca analisada. Todos os polissacarídeos testados causaram redução (p<0,05) no acúmulo da matéria seca, sendo que concentrações baixas causaram a inibição máxima observada. Estes resultados sugerem que as moléculas utilizadas nestes experimentos alteram o padrão de crescimento, em termos de massa, de células de cenoura crescidas in vitro.
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