Avaliação das linhagens transformadas do fungo Phyllosticta citricarpa com o gene repórter gfp, para estudo da interação fungo-planta

Abstract

Resumo : O Brasil é destaque na produção de frutas cítricas, especialmente laranjas, sendo o maior produtor e exportador de suco da fruta. A União Européia é o principal mercado importador do produto brasileiro. No entanto, prejuízos nas exportações da fruta ocorrem por doenças que são quarentenárias A1 nos mercados internacionais de destino, uma dessas é a Mancha Preta dos Citros, causada pelo fungo Phyllosticta citricarpa. A agrotransformação do fungo P. citricarpa foi realizada com sucesso anteriormente pelo grupo. Esses tais transformantes expressam a proteína fluorescente verde GFP (Green Fluorescent Protein) e resistência ao glifosinato de amônio. As linhagens transformadas serão utilizadas em experimentos de indução de sintomas em frutos cítricos, com vista a estudos de epidemiologia e transcriptoma. Para tanto, no presente trabalho, fez-se necessária a avaliação de linhagens transformadas a fim de selecionar aquelas que apresentem expressão do gene gfp in vivo, observadas pela a utilização de microscópio de epi-fluorescência, melhor taxa de crescimento micelial e maior produção de estruturas de reprodução assexuada em discos foliares de citros. A seleção foi realizada com sucesso, sendo que as linhagens escolhidas apresentam emissão de fluorescência verde causada pela expressão do gene gfp, produção de estruturas reprodutivas semelhante e crescimento micelial superior à linhagem selvagem.