Caracterização de proteínas TIA-like em Trypanossoma cruzi

Abstract

Resumo : Trypanosoma cruzi, o agente etiológico da doença de Chagas, é um organismo amplamente estudado devido a sua importância médica e também por possuir características peculiares que o tornam um bom modelo de estudo para questões biológicas básicas. A repressão de RNAs mensageiros em grânulos citoplasmáticos compostos de complexos mRNA-proteína (mRNPs) é uma importante via de regulação pós transcricional em eucariotos e, recentemente, foi demonstrado que grânulos de RNA estão presentes em T. cruzi. Alguns ortólogos de proteínas humanas envolvidas em mecanismos de regulação foram encontrados nestas estruturas e caracterizados, mas a função e composição de grânulos de mRNA neste modelo experimental permanecem desconhecidas. Em humanos e outros eucariotos, condições de estresse como calor, radiação UV, presença de agentes citotóxicos ou deficiência de glucose podem induzir a formação de grânulos de estresse, um tipo de estrutura citoplasmática envolvida em repressão, separação e armazenamento de mRNA durante condições adversas. Foram encontradas, em banco de dados de T. cruzi, três sequências de proteínas que possuem certa similaridade estrutural com as proteínas humanas TIA1 e TIAR. Os genes correspondentes foram clonados utilizando-se a tecnologia Gateway®, para a obtenção de proteínas recombinantes. As proteínas purificadas foram utilizadas para produzir anticorpos policlonais em camundongos, os quais puderam elucidar a localização celular e padrões de expressão destas proteínas durante o ciclo de vida do parasita. A caracterização destas proteínas pode ajudar a elucidar melhor os mecanismos de regulação pós transcricional em T. cruzi.