Padronização de metodologias aplicadas ao estudo da exposição de embriões de aves a contaminantes ambientais

Abstract

Resumo : Atualmente os embriões de aves têm sido frequentemente utilizados como modelo de estudos experimentais por serem de fácil obtenção e monitoramento, pelo curto período de desenvolvimento, por sua maior sensibilidade à ação de agentes químicos entre outras vantagens. Diversas substâncias podem agir sobre os mecanismos da embriogênese, alterando as características normais do indivíduo. O cádmio (Cd) é um metal pesado de elevada toxicidade e apresenta vários trabalhos que relatam seus efeitos adversos em uma variedade de modelos animais, inclusive em embriões de galinha. Para avaliar as condições em que um organismo se encontra é possível utilizar biomarcadores que demonstrem alterações a nível tecidual, celular ou molecular. Como o embrião de ave apresenta vários aspectos que favorecem seu uso como modelo de estudo em toxicologia, surgiu a necessidade da padronização de metodologias aplicadas ao estudo da exposição de embriões de aves a contaminantes ambientais para serem utilizadas no laboratório de Biologia do Desenvolvimento e de Toxicologia celular da UFPR. Para o presente trabalho, embriões de Gallus gallus (galinha) foram expostos ao cádmio através da injeção da solução de cloreto de cádmio (5 µM e 50 µM) na região da câmara de ar do ovo. O grupo controle recebeu injeção de solução de PBS. Após a exposição, os ovos foram incubados durante 48 h e 72 h, que correspondem aos estágios de desenvolvimento embrionários 12-13 e 18-19 (HAMBURGER e HAMILTON, 1951), respectivamente. Para as análises morfológicas os embriões foram fixados em Carnoy e corados com Carmalúmen de Mayer. As atividades enzimáticas da Glucose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH) e da Glutationa S-transferase (GST) dos embriões foram quantificadas em um espectrofotômetro de microplaca. Durante a coleta dos embriões houve uma perda significativa de indivíduos que rasgaram (principalmente os embriões de 48 h), além dos que morreram ou não desenvolveram. Verificou-se que os indivíduos expostos à maior dose de Cd apresentaram mais alterações, principalmente na região cefálica, que os embriões dos demais grupos. Nas análises enzimáticas, houve um aumento na atividade específica da G6PDH em embriões num estádio mais avançado de desenvolvimento. Portanto, os embriões de galinha demonstraram ser bons modelos de estudo para contaminantes ambientais, apresentando elevada sensibilidade ao cádmio.