Desenvolvimento de imunógeno bacteriano de Pseudomonas aeruginosa conjugado ao toxóide tetânico

Abstract

Resumo: Pseudomonas aeruginosa e uma bacteria gram-negativa responsavel por diversas doencas e manifestacoes clinicas. Sua virulencia permite a infeccao e colonizacao de individuos pertencentes a grupos de risco, como imunocomprometidos, queimados e portadores de fibrose cistica. O presente estudo visa o desenvolvimento de uma vacina a base de Lipopolissacarideo (LPS), antigeno consagrado em diversos protocolos de imunizacao. Este antigeno foi conjugado a proteina, constituindo uma vacina conjugada. Vacinas conjugadas sao imunogenos nao-proteicos que, ao serem ligados a uma proteina, adquirem uma nova propriedade: geracao de memoria imunologica. A proteina utilizada no estudo e o toxoide tetanico (toxina inativada do Clostridium tetani, TT). Ainda, capacita neonatos e criancas a interagirem com um antigeno contra o qual nao responderiam normalmente. A tecnica de conjugacao utilizada foi a aminacao redutiva direta, avaliada como simples e de baixo custo. Atraves da adaptacao do protocolo de Shen e colaboradores, foi possivel conjugar o Lipopolissacarideo ao toxoide tetanico (LPS-TT). Avaliou-se a resposta in vivo atraves de aplicacoes intraperitoneais do imunogenos em camundongos Swiss, atraves de dois protocolos: o primeiro avalia a formacao de anticorpos anti-pseudomonas pela imunizacao com LPS, LPS e TT ou LPS-TT. O segundo avalia a formacao de anticorpos utilizando LPS, LPS e TT, ou LPS-TT apos aplicacao intraperitoneal de bacterina (celula inativada de P. aeruginosa). Os grupos que foram imunizados com LPS e TT e LPS-TT (20 e 40 ƒÊg/ml) apresentaram resposta de anticorpos aglutinantes superior ao controle LPS.