Desenvolvimento e validação de metodologia analítica para determinação de dissolução de sulfato ferroso em comprimidos por espectrofotometria UV-VIS

Abstract

Resumo: A anemia ferropriva ou por deficiência de ferro é a deficiência nutricional maiscomumente acometida no mundo e ocorre devido a perdas sanguíneas crônicas eingestão e/ou absorção insuficientes de ferro, resultando na redução de seus níveisplasmáticos, limitando assim a eritropoiese. A utilização de suplementaçãomedicamentosa com sais de ferro, como, por exemplo, sulfato ferroso por via oral éa terapia inicial para o tratamento da anemia ferropriva. As indústrias farmacêuticasprecisam garantir a qualidade e eficácia dos medicamentos distribuídos a população,a fim de assegurar um tratamento adequado aos pacientes. Os testes de controle dequalidade são de extrema importância para assegurar que o produto cumpra asespecificações às quais se preconiza, se mostrando próprios para sua utilização.Realizar uma validação de método analítico é a certeza de que o produto está dentrode especificações, isto gera segurança e eficácia no uso do produto por parte dosusuários. Neste sentido propõe-se contribuir com a indústria farmacêutica um novométodo analítico para quantificação da dissolução de sulfato ferroso emcomprimidos. O objetivo deste trabalho foi o de desenvolver e validar o método dequantificação do teor de sulfato ferroso dissolvido em comprimidos pela técnica deespectrofotometria UV-VIS através do método da 1,10 - fenantrolina. O métodoanalítico foi realizado nas mesmas condições que a monografia da USP41-NF36"Ferrous Sulfate Tablets" preconiza em relação às condições analíticas para oensaio de dissolução. A alíquota retirada da cuba foi doseada no espectrofotômetroa partir de uma reação do ferro com a 1,10- fenantrolina, que forma o complexo decoloração alaranjada possuindo absorção de energia em 510nm. Os parâmetrosavaliados foram: Seletividade, Linearidade, Precisão, Exatidão, Robustez e Intervalo.As amostras dos comprimidos de sulfato ferroso foram fornecidas pelo LaboratórioNesh. Foram notadas ausências de interferências detectáveis nos valores deabsorbância para o analito na análise espectrofotométrica, o placebo e a soluçãobranco não apresentaram absorbância no comprimento de onda testado, altasimilaridade entre os perfis espectrais da amostra e padrão, assegurando que o picoobservado na amostra é o mesmo do padrão, e ainda recuperações acima de 80%nos ensaios de padrão, amostra e placebo com adição de padrão o que validou oparâmetro de seletividade. A linearidade foi determinada pelo coeficiente decorrelação e de determinação, que resultaram nos valores de 0,9944 e 0,9923respectivamente. O método se demonstrou linear quando realizada a análiseestatística. Os parâmetros de precisão apresentaram coeficiente de variação inferiora 4,0% e todos os valores de teor dissolvidos apresentaram-se acima de 80%. Aexatidão foi verificada a partir das concentrações baixa, média e alta, contaminascom placebo. As replicatas apresentaram coeficiente de variação inferior a 4,0% erecuperações do ativo dentro da faixa de 100% – 102%. Para análise da robustezforam analisadas variações no pH da solução e diferentes fabricantes do indicador.O método se manteve estável com essas pequenas modificações, sendo, portanto,robusto. Métodos espectrofotométricos apresentam boa sensibilidade e tem custosmais acessíveis. Este método validado apresentou-se satisfatório para adeterminação de dissolução de sulfato ferroso em comprimidos, podendo serutilizado como um método rápido, seguro, preciso e de menor custo, comoalternativa para as indústrias farmacêuticas.

Abstract: Iron deficiency anemia or iron deficiency anemia is the most commonly affectednutritional deficiency in the world and occurs due to chronic blood loss andinsufficient iron intake and/or absorption, resulting in a reduction of its plasma levels,thus limiting erythropoiesis. The use of drug supplementation with iron salts, such asoral ferrous sulfate, is the initial therapy for the treatment of iron deficiency anemia.Pharmaceutical companies need to guarantee the quality and efficacy of medicinesdistributed to the population, in order to ensure adequate treatment for patients.Quality control tests are extremely important to ensure that the product complies withthe recommended specifications, showing itself to be suitable for its use. Performingan analytical method validation is the certainty that the product is withinspecifications, this generates safety and effectiveness in the use of the product byusers. In this sense, it is proposed to contribute with the pharmaceutical industry anew analytical method to quantify the dissolution of ferrous sulfate in tablets. Theobjective of this work was to develop and validate a method for quantifying thecontent of ferrous sulfate dissolved in tablets by UV-VIS spectrophotometry using the1,10 - phenanthroline method. The analytical method was performed under the sameconditions as the USP41-NF36 monograph "Ferrous Sulfate Tablets" recommends inrelation to the analytical conditions for the dissolution test. The aliquot removed fromthe vessel was measured in the spectrophotometer from a reaction of iron with 1,10-phenanthroline, which forms the orange colored complex having energy absorption at510nm. The parameters evaluated were: Specificity, Linearity, Precision, Accuracy,Robustness and Range. Samples of ferrous sulfate tablets were provided by NeshLaboratory. There were no detectable interferences in the absorbance values for theanalyte in the spectrophotometric analysis, the placebo and the white solution did notpresent absorbance at the wavelength tested, high similarity between the spectralprofiles of the sample and standard, ensuring that the peak observed in the sample isthe same as the standard, and recoveries above 80% in the standard, sample andplacebo assays with the addition of the standard, which validated the specificityparameter. Linearity was determined by the correlation and determination coefficient,which resulted in values of 0.9944 and 0.9923 respectively. The method proved to belinear when performing the statistical analysis. The precision parameters showed acoefficient of variation lower than 4.0% and all dissolved content values were above80%. Accuracy was verified from low, medium and high concentrations of placebocontaminates. The replicates showed a coefficient of variation of less than 4.0% andasset recoveries within the range of 100% – 102%. To analyze the robustness,variations in the pH of the solution and different manufacturers of the indicator wereanalyzed. The method remained stable with these small modifications, beingtherefore robust. Spectrophotometric methods have good sensitivity and are moreaffordable. This validated method was satisfactory for the determination of ferroussulfate dissolution in tablets, and can be used as a fast, safe, accurate and lowercost method, as an alternative for the pharmaceutical companies.