Desenvolvimento de bolhas retinianas em cães com atrofia progressiva de retina : avaliação da cicatrização, espessura e transparência corneana por ultrassom UBM após realização de crosslinking em cães com úlceras profundas e degradadas

Abstract

Resumo: Objetivo: Integrar e comparar evidências clínicas e de imagem em dois domínios-chave da oftalmologia veterinária: (1) caracterização de descolamentos focais bolhosos da retina (bolhas) em diferentes formas geneticamente distintas de atrofia progressiva da retina (APR) e (2) avaliação da cicatrização da córnea, alterações paquimétricas e transparência após o tratamento com cromóforo fotoativado para ceratite-crosslinking da córnea (PACK-CXL) em úlceras corneanas infecciosas e degradativas ("derretimento"), que são particularmente prevalentes em raças braquicefálicas. Métodos: (1) Cães afetados por APR (cruzamentos de Whippet, Spitz Alemão e Papillon portadores de mutações no gene CNGB1) foram submetidos a oftalmoscopia indireta e tomografia de coerência óptica de domínio espectral (SD-OCT) para monitoramento longitudinal das bolhas retinianas. As sequências codificadoras e intrônicas flanqueadoras de BEST1 foram sequenciadas em pelo menos um cão afetado por raça, e um cão mutante para CNGB1 recebeu terapia de aumento gênico. (2) Vinte e quatro olhos com úlceras infecciosas ou degradativas foram tratados com PACK-CXL (riboflavina/UVA). A espessura da córnea foi medida usando paquimetria ultrassônica (UP) e biomicroscopia ultrassônica (UBM). A opacidade da córnea foi quantificada objetivamente a partir de imagens de UBM usando o ImageJ®. Quando disponíveis, os olhos contralaterais serviram como controles pareados. Resultados: (1) Bolhas retinianas foram achados precoces frequentes, precedendo o afinamento retiniano evidente e tornando-se menos evidentes à medida que a degeneração progredia; elas estavam ausentes em portadores heterozigotos. O sequenciamento de BEST1 não revelou variantes patogênicas. A amplificação gênica em um cão mutante para CNGB1 pareceu prevenir a formação de bolhas. (2) Após o PACK-CXL, todos os 24 olhos reepitelizaram em 30 dias. Nenhuma diferença estatisticamente significativa na espessura da córnea entre os olhos tratados e os controles foi detectada por ultrassonografia (UP), enquanto a biomicroscopia ultrassônica (UBM) revelou diferenças significativas. Comparando as modalidades, a diferença de espessura entre UP e UBM diferiu de zero em todos os subgrupos, indicando discordância sistemática dependente da modalidade. A análise quantitativa da opacidade mostrou opacidade significativamente maior nos olhos tratados do que nos controles contralaterais, tanto avaliando o estroma isoladamente quanto o estroma mais o epitélio. Conclusões: As bolhas retinianas representam um marcador clínico precoce e potencialmente modificável em múltiplas atrofias retinianas caninas e podem responder à terapia gênica. O PACK CXL surge como um adjuvante promissor e custo-efetivo para o tratamento de úlceras infecciosas ou ulceradas. A ultrassonografia (UP) e a biomicroscopia ultrassônica (UBM) são ferramentas complementares para o monitoramento da espessura da córnea, apesar de diferenças sistemáticas, e a UBM permite a quantificação objetiva da opacidade por meio do ImageJ®. Mais estudos randomizados e controlados são necessários para ampliar a base de evidências e refinar as indicações clínicas

Abstract: Objective: To integrate and compare clinical and imaging evidence in two key domains of veterinary ophthalmology: (1) characterization of focal bullous retinal detachments (bullae) across genetically distinct forms of progressive retinal atrophy (PRA), and (2) assessment of corneal healing, pachymetric changes, and transparency following photoactivated chromophore for keratitis–corneal cross-linking (PACK-CXL) in infectious, degradative ("melting") corneal ulcers, which are particularly prevalent in brachycephalic breeds. Methods: (1) PRA-affected dogs (Whippets, German Spitzes, and Papillon crosses carrying CNGB1 mutations) underwent indirect ophthalmoscopy and spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) for longitudinal monitoring of retinal bullae. The coding and flanking intronic sequences of BEST1 were sequenced in at least one affected dog per breed, and one CNGB1-mutant dog received gene-augmentation therapy. (2) Twenty-four eyes with infectious or degradative ulcers were treated with PACK-CXL (riboflavin/UVA). Corneal thickness was measured using ultrasonic pachymetry (UP) and ultrasound biomicroscopy (UBM). Corneal opacity was objectively quantified from UBM images using ImageJ®. When available, contralateral eyes served as paired controls. Results: (1) Retinal bullae were frequent early findings, preceding overt retinal thinning and becoming less evident as degeneration progressed; they were absent in heterozygous carriers. BEST1 sequencing revealed no pathogenic variants. Gene augmentation in a CNGB1-mutant dog appeared to prevent bulla formation. (2) After PACK-CXL, all 24 eyes re-epithelialized within 30 days. No statistically significant difference in corneal thickness between treated and control eyes was detected by UP, whereas UBM revealed significant differences. Comparing modalities, the UP–UBM thickness delta differed from zero across all subgroups, indicating systematic, modality-dependent disagreement. Quantitative opacity analysis showed significantly greater opacity in treated eyes than in contralateral controls, whether assessing the stroma alone or stroma plus epithelium. Conclusions: Retinal bullae represent an early and potentially modifiable clinical marker in multiple canine PRAs and may respond to gene therapy. PACK-CXL emerges as a promising and cost-effective adjunct for the management of infectious or melting ulcers. UP and UBM are complementary tools for monitoring corneal thickness despite systematic differences, and UBM allows objective opacity quantification via ImageJ®. Further randomized, controlled studies are warranted to expand the evidence base and refine clinical indications