Pesquisa da heterorresistência à vancomicina em Staphylococcus aureus isolados de pacientes em ambiente hospitalar

Abstract

Resumo: Staphylococcus aureus é um microrganismo gram-positivo envolvido em infecções cutâneas e sistêmicas. Cepas de S. aureus resistentes à meticilina (MRSA) estão associadas a elevada morbimortalidade e são classificadas pela Organização Mundial da Saúde (OMS) como prioridade crítica no enfrentamento da resistência antimicrobiana. Desde 1997, tem sido relatado o aumento na detecção do fenótipo de heterorresistência à vancomicina (hVISA) entre isolados MRSA. Essa forma de resistência pode não ser detectada por métodos laboratoriais convencionais, pois apresenta concentração inibitória mínima (CIM) aparentemente suscetível embora abrigue subpopulações resistentes. Considerando que tal fenótipo pode comprometer a eficácia terapêutica da vancomicina em infecções por S. aureus, o objetivo do estufoi avaliar a presença de heterorresistência à vancomicina em isolados clínicos de MRSA obtidos de pacientes atendidos no Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC-UFPR). Entre março de 2023 e março de 2025, 95 isolados de MRSA provenientes de hemoculturas, lavado broncoalveolar, aspirado traqueal, abscessos, biópsias, escarro, secreções e urina foram selecionados. Todos os isolados incluídos no estudo tiveram a identificação confirmada por espectrometria de massa (MALDI-TOF), e a detecção do mecanismo de resistência à meticilina por reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção do gene mecA. O teste de sensibilidade antimicrobiana foi realizado pelo sistema automatizado Phoenix BD ® e a pesquisa de heterorresistência à vancomicina por triagem em ágar BHI com 4 µg/mL de vancomicina. Dados clínicos e sociodemográficos foram obtidos dos prontuários dos pacientes. Para a análise estatística foram realizados os testes Qui-quadrado ou teste exato de Fisher e estimadores de Kaplan-Meier, utilizando o software R versão 4.5.1. Adotou-se nível de significância de 5%. Os resultados das CIMs de vancomicina variaram de 0,5 a 2,0 µg/mL, sendo que a maior parte dos isolados (n=63, 66,3%) apresentou valor de CIM igual a 1,0 µg/mL. Nas amostras estudadas, não foi observado o fenótipo hVISA. Os isolados demonstraram resistência à eritromicina (n=84, 91,3%), ciprofloxacino (n=62, 65,3%) e clindamicina (n=50, 53,8%). Houve associação entre infecção por MRSA e internação em UTI (p=0.001). A diferença entre as curvas de sobrevivência, de acordo com local de atendimento hospitalar foi estatisticamente significativa tanto para o óbito geral (p = 0,0092) quanto para o óbito em até 30 dias após a infecção (p = 0,0037). A obtenção de CIMs próximas ao ponto de corte, reforça a importância da vigilância microbiológica contínua e monitoramento do perfil de resistência desse patógeno

Abstract: Staphylococcus aureus is a Gram-positive microorganism involved in both cutaneous and systemic infections. Methicillin-resistant S. aureus (MRSA) strains are associated with high morbidity and mortality and are classified by the World Health Organization (WHO) as a critical priority in the global response to antimicrobial resistance. Since 1997, an increase in the detection of the vancomycin heteroresistance phenotype (hVISA) among MRSA isolates has been reported. This form of resistance may not be detected by conventional laboratory methods, as it exhibits an apparently susceptible minimum inhibitory concentration (MIC) despite harboring resistant subpopulations. Considering that this phenotype may compromise the therapeutic efficacy of vancomycin in S. aureus infections, the aim of this study was to assess the presence of vancomycin heteroresistance in clinical MRSA isolates obtained from patients treated at the Hospital de Clínicas Complex of the Federal University of Paraná (CHC UFPR). Between March 2023 and March 2025, 95 MRSA isolates obtained from blood cultures, bronchoalveolar lavage, tracheal aspirates, abscesses, biopsies, sputum samples, secretions, and urine were selected. All isolates included in the study had their identification confirmed by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of flight mass spectrometry (MALDI-TOF), and methicillin resistance was confirmed by polymerase chain reaction (PCR) detection of the mecA gene. Antimicrobial susceptibility testing was performed using the BD Phoenix® automated system, and screening for vancomycin heteroresistance was conducted on BHI agar containing 4 µg/mL of vancomycin. Clinical and sociodemographic data were obtained from patients’ medical records. Statistical analyses were performed using the chi-square test or Fisher’s exact test, as well as Kaplan–Meier estimators, with R software version 4.5.1. A significance level of 5% was adopted. Vancomycin MIC values ranged from 0.5 to 2.0 µg/mL, with the majority of isolates (n = 63, 66.3%) presenting an MIC of 1.0 µg/mL. The hVISA phenotype was not observed in the samples analyzed. The isolates showed resistance to erythromycin (n = 84, 91.3%), ciprofloxacin (n = 62, 65.3%), and clindamycin (n = 50, 53.8%). An association was observed between MRSA infection and intensive care unit (ICU) admission (p = 0.001). Differences between survival curves according to the hospital care setting were statistically significant for both overall mortality (p = 0.0092) and 30-day mortality after infection (p = 0.0037). MIC values approaching the breakpoint reinforce the importance of continuous microbiological surveillance and monitoring of the resistance profile of this pathogen