Ação anticoagulante de polissacarídeos modificados através de reações de sulfatação

Abstract

Resumo: Duas galactoglucomananas extraídas dos liquens Cladonia ibitipocae e Cladonia connexa apresentando uma relação molar de Gal:Glc:Man de 35:2:60 e 38:5:55, respectivamente, foram derivatizadas por sulfatação com a finalidade de tentar estabelecer a ação anticoagulante desses derivados. Com o objetivo de produzir moléculas com alto conteúdo em sulfato, foram realizadas cinco suffatações seqüenciais para cada galactoglucomanana. Os derivados sulfatados de C. ibitipocae foram denominados de S1, S2, S3, S4 e S5 e os de C. connexa foram denominados de S1a, S2a, S3a, S4a e S5a, conforme o número de sulfatações ao qual foram submetidos e apresentaram os seguintes graus de substituição (D.S.): 0,20; 0,51; 0,87; 1,08; 1,29 e 0,24; 0,50; 0,98; 1,21; 1,54, respectivamente. Verificou-se que a substituição nas hidroxilas pelos grupos sulfato ocorre preferencialmente em C-6 em ambos os polímeros, conforme demonstrado por estudos de RMN 13C, onde se observa o desaparecimento dos sinais de C-6 livre (ô 62-63 ppm) à medida que ocorre a sulfatação e surgimento de um sinal em tomo de ô 69 ppm referente ao C-6 substituído. A análise realizada por cromatografia de exclusão estérica de alta pressão (HPSEC), demonstrou que os derivados sulfatados de ambas as galactoglucomananas são heterogêneos e constituídos por uma família de galactoglucomananas com massas molares diferenciadas. As análises de atividade anticoagulante foram realizadas através dos testes TT e APTT utilizando um pool de plasma humano normal, onde os resultados obtidos foram relacionados com os de uma heparina padrão (142 Ul/mg). Os derivados sulfatados S5 (D.S. 1,29) da galactoglucomanana de C. ibitipocae e S4a (D.S. 1,21) de C. connexa apresentaram uma ação anticoagulante máxima em uma concentração de 25 e 30 jig/mL de plasma para o teste APTT e TT, respectivamente