Polissacarideos sulfatados isolados de Bostrychia montagnei (Rhodophyta, ceramiales)

Abstract

Resumo: A alga Bostrychia montagnei foi submetida a extrações aquosas, na temperatura de 25°C e a 85°C. As frações poiissacarídicas purificadas representam aproximadamente 17% do peso da alga seca. A galactose é o principal monossacarídeo presente nestas frações (64,8 - 73,7 moles%). 3,6- anidrogalactose e seu derivado 2-O-metil, estão presentes em pequena quantidade (13,3 -18,5 moles%), assim como, outras unidades metiladas, tais como, 6-O-metil (6,4 - 7,9 moles%) e 2-O-metilgalactose (0,2 - 2,2 moles%). Também foi observada a presença de unidades de xilose (3,6 - 7,3 moles%) e glucose (1,0 - 2,8 moles%). Os polissacarídeos solúveis em água (25°C) foram separados por cromatografia de troca iônica em seis frações com rotação ótica específica negativa. A análise conjunta de metilação e espectroscopia de R.M.N.-13C demonstraram que as frações B-1,25 e B-1,5 são constituídas por unidades repetitivas alternadas de (3-D-galactopiranose 3-O-substituída e a-L- galactopiranose 4-O-substituída, característica do tipo ágar. As unidades D- em B-1,25 e em B-1,5 são parcialmente sulfatadas em C-6 (27% e 43%), em C-4 (29 e 25%) e metiladas em C-6 (8 e 12%, respectivamente). Aproximadamente, 36% das unidades L-, em B-1,25, e 26%, em B-1,5, estão presentes como 3,6- anidrogalactose; 28%, em B-1,25, e 37%, em B-1,5, como unidades de L- galactose 3-sulfato. A galactana sulfatada B-1,5 apresentou atividade antiherpética (CI50 5,5 pg/ml para HSV-1 e 6,2 pg/ml para HSV-2) sem afetar a viabilidade das células Vero, até a concentração de 1000 pg/ml. De modo distinto, a galactana B-1,25 não demonstrou atividade contra os vírus HSV-1 e 2. Estas galactanas não apresentaram atividade anticoagulante. A fração B-1,5 exerce sua ação impedindo a adsorção viral. A porcentagem de grupos sulfato em C-6, das unidades de p-D-galactopiranose, pode estar correlacionada com a atividade antiherpética

Abstract: Bostrychia montagnei was submitted to aqueous extraction at 25°C and 85°C. The purified polysaccharide extracts represent -17% of dry alga, galactose is being the principal monosaccharide component of these extracts (64.8-73.7 mols%). 3,6-Anhydrogalactose and its 2-O-methyl derivative were also present in smaller amounts (13.3-18.5 mols%), as well as other methylated sugars, namely 6-0- (6.4-7.9 mols%) and 2-0-methylgalactose (0.2-2.2 mols%). Xylose (3.6-7.3 mols%) and glucose (1.0-2.8 mols%) were also detected. The aqueous extracted polysaccharides (25°C) were separated by anion-exchange chromatography into six sulfated galactan fractions with negative specific rotations. A combination of linkage (methylation) and 13C-NMR spectroscopic analyses showed that the galactans B-1.25 and B-1.5 were composed of an agar-type backbone of alternating 3-linked p-D- and 4-linked a-L-galactopyranosyl units. The D-residues in B-1.25 and B-1.5 were partially sulfated on 0-6 (27 and 43%) and 0-4 (29 e 25%) and methylated on 0-6 (8 and 12%, respectively). About 36%, B-1.25, and 26%, B-1.5, of the L-residues are present as the 3,6-anhydride and 28%, B-1.25, and 37%, B-1.5, as L-galactosyl 3-sulfate. The galactan sulfate B-1.5 showed a dose-dependent inhibition of replication of the herpes simplex virus (HSV-1 and HSV-2) in Vero cells, with 50% effective doses in the range of 5.5-6.2 pg/ml, respectively, without affecting cell viability at concentrations up of 1000 pg/ml. In contrast, galactan B-1.25 showed no inhibition effect against HSV replication. These galactans did not have anticoagulant activity. The mode of action of B-1.5 can ascribed to an inhibitory effect on virus absorption. The presence of 6-sulfate groups seems to be important in order to give rise to antiviral activity