dc.contributor.advisor | Souza, Luiz Eduardo Rizzo de | pt_BR |
dc.contributor.author | Bilek, Evandro Santos | pt_BR |
dc.contributor.other | Zanata, Silvio Marques, 1974- | pt_BR |
dc.contributor.other | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | pt_BR |
dc.date.accessioned | 2022-08-24T18:23:09Z | |
dc.date.available | 2022-08-24T18:23:09Z | |
dc.date.issued | 2014 | pt_BR |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/1884/35690 | |
dc.description | Orientador: Luiz Eduardo Rizzo de Souza | pt_BR |
dc.description | Coorientador: Silvio Marques Zanata | pt_BR |
dc.description | Monografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | pt_BR |
dc.description.abstract | Resumo : A GTPase Rnd1 é um membro da família Rho de GTPases que apresenta a peculiaridade de estar constitutivamente em seu estado ativo (ligado a GTP). Seu papel na célula está ligado à plasticidade do citoesqueleto, com especial importância no desenvolvimento do sistema nervoso. A proteína STI-1, assim como a Rnd1, é expressa em neurônios e células da glia. Dentre suas funções estão neuroproteção, neuritogênese, dobramento de proteínas (é uma co-chaperona), e, mais recentemente, regulação do citoesqueleto. Considerando o papel desempenhado pelas duas proteínas no desenvolvimento do sistema nervoso, e a literatura científica atual, levantou-se a hipótese de que as duas pudessem atuar em conjunto, e que STI1 possivelmente seria responsável por regular a atividade da Rnd1. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar uma possível interação in vitro entre Rnd1 e STI1. Para tanto, foram expressas em sistema heterólogo de E. coli as GTPases recombinantes Rnd1, Rnd2, e RhoD, previamente clonadas em vetores pGEX 4T2, que confere um tag de GST. Tais proteínas foram imobilizadas em matriz sólida de Glutationa-Sepharose e incubadas com extratos totais de encéfalo de camundongos para ensaios de pulldown. As proteínas foram eluídas das matrizes com tampão de amostra. Os eluatos foram então analisados em SDS-PAGE e western blotting com os anticorpos específicos anti-GST e anti-STI1. Os resultados evidenciaram interação específica entre GST-Rnd1 e STI1. As três proteínas citadas foram também expressas em larga escala e purificadas, para ensaios bioquímicos futuros. | pt_BR |
dc.format.extent | 1 recurso online : PDF. | pt_BR |
dc.format.mimetype | application/pdf | pt_BR |
dc.language | Português | pt_BR |
dc.relation.requires | Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader | pt_BR |
dc.subject | Proteínas | pt_BR |
dc.subject | Bioquímica | pt_BR |
dc.title | Expressão de gtpases recombinates : purificação e uso em enssaios de pull-down | pt_BR |
dc.type | Monografia Graduação Digital | pt_BR |