Estudo das alterações de populações de precursores de mastócitos na medula óssea de rato, após depleção da cavidade peritoneal

Abstract

Resumo : Mastócitos são células do tecido conjuntivo responsáveis pelas reações alérgicas e processos inflamatórios. Os precursores destas células são originados da medula óssea e migram para os tecidos. No entanto, na medula óssea é possível encontrar mastócitos em todos os estágios de maturação. Os anticorpos monoclonais AA4 (mAb AA4), específico para um gangliosídeo da superfície de mastócitos, e mAb BGD6, específico para uma proteína desta célula, foram conjugados a esreras magnéticas. O mAb AA4 conjugado às esferas magnéticas permitiu isolar a população de mastócitos da medula óssea, que apresentou células em diferentes estágios de maturação. O mAb BGD6 conjugado às esferas magnéticas, além de isolar a mesma população de mastócitos identificada pelo mAb AA4, isolou células precursoras indiferenciadas, pertencentes a linhagem de mastócitos. O isolamento sequencial, utilizando o mAb BGD6 conjugado às esferas logo após a separação imunomagnética com o mAb AA4, permitiu que se isolasse somente a população de células indiferenciadas, não isoladas anteriormente pelo mAb AA4. Estas células ainda foram imunomarcadas com um anticorpo policlonal anti o receptor para o c-kit ligante, presente em mastócitos mas não em basófilos. Após isoladas, tanto pelo mAb AA4 quanto pelo mAb BGD6 conjugados às esferas magnéticas, as células foram coradas com azul de toluidina a 0,1%, pH 2,8 e contadas em câmara de Neubauer. Através desta contagem foi possível estimar e determinar as variações sofridas peJas populações de células diferenciadas e indiferenciadas da medula óssea após depleção dos mastócitos da cavidade peritoneal de ratos pela injeção intraperitoneal de água destilada. A população de células isoladas pelo mAb AA4 conjugado às esferas magnéticas foi estimada em 2,4%. Dois dias após a depleção da cavidade peritoneal esta população diminuiu para 0,3%, após 6 dias aumentou para 0,49% e no 10°. dia atingiu 0,66%. Através do isolamento sequencial com o mAb BGD6 conjugado às esferas magnéticas pode-se estimar que a população de células indiferenciadas da medula óssea, pertencentes à linhagem de mastócitos, corresponde a 0,02%. No 2°. dia após a depleção da cavidade peritoneal, esta população cresce para 0,33%, decai para 0.26% no 6°. dia e atinge 0,4% no 10°. dia após a depleção. Estes resultados sugerem que além de precursores, mastócitos em maturação podem deixar a medula óssea para povoar os tecidos.