Papel do CA2+ extracelular e do receptor sensível a cálcio (CaR) na regulação da H+-K+- atpase renal
Resumo
Resumo : Os rins participam de funções como órgãos excretores, reguladores e de síntese de hormônios. Como órgãos reguladores, mantêm a homeostase acidobase por mecanismos de secreção de prótons e reabsorção de bicarbonato principalmente em células intercalares do ducto coletor cortical (DCC). Esse manuseio pode dar-se por bombas vacuolares, ou bombas do tipo P, como a H + - K + - ATPase, e tanto hormônios quanto íons, que agem como co-fatores, podem modular sua atividade. O Ca2+ está entre os íons que podem modular a atividade das ATPases, e qualquer modificação nas suas concentrações é precisamente detectada por uma gama de células especializadas. Presumivelmente, essa sensibilidade se deve ao Receptor Sensível a Cálcio (CaR), expresso em todos os segmentos do néfron. Esse receptor apresenta, entre outros, controle da secreção de hormônios, equilíbrio do cálcio extracelular e do cloreto de sódio. Devido a tantas descobertas recentes sobre as diversas funções do CaR, este projeto tem como objetivo investigar a interação do mesmo com o transporte de prótons através da H+ -K + -ATPase no córtex e na medula externa do rim de camundongo. Foram realizados testes de atividade bioquímica onde foi medida a atividade da bomba H + -K + ATPase em frações de membranas plasmáticas obtidas a partir das regiões do córtex e da medula externa de rim de camundongo. Foram utilizados os reagentes gadolinium (Gd3+) e neomicina, conhecidos agonistas de CaR e diferentes concentrações de cálcio extracelular. Os resultados mostram que Gd3+ 300µM estimulou de forma significativa a atividade da H+ -K + ATPase presente tanto no córtex (controle 13.812 3.327 e na presença de Gd3+ 26.862 7.385, p<0,05, n= 10), como na medula externa (controle 13.296 4.118 e na presença de Gd3+ 22.261 4.00, p<0,05, n= 10). Resultados similares foram observados ao utilizar Neomicina. Foi observado também que a atividade da H + -K + ATPase é sensível às mudanças nos níveis de Ca2+ extra, quanto maiores as concentrações de cálcio, maior o estímulo da bomba. Assim, concluímos que existe modulação significativa da H + -K + -ATPase pelo CaR.
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