Preparo de modelo experimental de osteartrose em joelho suíno por aplicação de adjuvante completo de Freund

Abstract

Resumo: A doença articular degenerativa (osteoartrose) causa dor, restrição funcional e piora da qualidade de vida, sendo mais frequente em pacientes idosos. As abordagens terapêuticas na osteoartrose (artrite) têm por objetivo melhorar os sintomas dolorosos e recuperar a função das articulações comprometidas. Para prevenir e/ou tratar a artrite degenerativa, é muito importante conhecer sua fisiopatologia, o que torna fundamental o desenvolvimento de modelos experimentais da doença. Vários estudos demonstram que o uso intra-articular do adjuvante completo de Freud (ACF) pode produzir osteoartrose em articulações femorotibiopatelar e temporomandibular em diversas espécies. O presente trabalho tem por finalidade avaliar a intensidade das alterações histopatológicas osteoarticulares relacionadas à inflamação local; alterações sinoviais; alterações da cartilagem de revestimento e dos condrócitos, induzidas pelo ACF na articulação do joelho em suínos, em tempos diferentes após sua injeção. Para isso, utilizaram-se 24 suínos Large White com peso entre 25 e 50 quilogramas. Dezoito deles receberam 1 ml de ACF e seis deles receberam 1 mL de Cloreto de Sódio a 0,9% (NACL 0,9%). Os animas que receberam ACF foram divididos em três grupos de seis animais cada, enquanto os animais que receberam NaCl 0,9% foram divididos em três grupos de animais cada. Os que receberam ACF passam a ser denominados de Grupo de Estudo (GE), sendo compostos por seis animais de acordo com o tempo de sacrifício: GE1 sacrificados com 7 dias, GE2 sacrificados com 21 dias e GE3 sacrificados com 35 dias. Os seis animais que receberam NaCl 0,9% passam a ser denominados de Grupo Controle (GC) e foram divididos em dois animais por grupo de acordo com o tempo de sacrifício: GC1 sacrificados com 7 dias; GC2 sacrificados com 21 dias e CG3 animais sacrificados com 35 dias. As alterações histopatológicas osteoarticulares relacionadas à inflamação, sinóvia; cartilagem de revestimento e condrócitos foram pontuadas e estabelecido um "escore". Os escores de cada uma das alterações histopatológicas são estudados estatisticamente pelo teste não paramétrico de Mann-Whitney para comparação entre cada grupo de estudo e seu respectivo grupo controle, Kruskal-Wallis, teste de Dunn e correção de Bonferroni para determinar a diferença dos achados entre os grupos de estudo. É possível determinar no presente estudo que a injeção de ACF produz alterações estatisticamente significativas no GE1, GE2 e GE3 quando comparados aos devidos GC, com relação à intensidade da inflamação; alterações sinoviais e de cartilagem. Não houve diferença estatística significativa nas alterações em condrócitos. O GE3 difere estatisticamente dos GE1 e GE2, apresentando alterações menos intensas em relação ao evento inflamatório e alterações sinoviais, mas apresenta maiores alterações em condrócitos. Pelo presente estudo, é possível determinar que o ACF produz alterações inflamatórias, sinoviais e de cartilagem em joelho de suínos no período de 7, 21 e 35 dias após sua injeção intra-articular, mas não são suficientes para caracterizar osteoartrose

Abstract: Degenerative joint disease (osteoarthritis) causes pain and functional restriction, as well as decreases one’s quality of life, being more frequent in elderly patients. Therapeutic approaches to treat osteoarthritis aim to treat painful symptoms and recover function in the compromised joints. To prevent and/or treat degenerative arthritis, it’s essential to understand its pathophysiology and develop some of the disease’s experimental models. Many studies demonstrate that the intra-articular use of Freund’s Complete Adjuvant (FCA) can cause osteoarthritis in femorotibiopatellar and temporomandibular joints in many species. This study aims to assess how intense osteoarticular histopathology alterations are in terms of local inflammation, synovial alterations, chondrocytes and coating cartilage alterations induced by FCA in pigs’ knee joints in different periods of time after their injection. Twenty-four Large White pigs weighing 25 to 50kg were used for this experiment. Eighteen of them received an injection of 1ml of FCA and six of them received 1ml of 0.9% sodium chloride (NaCl 0.9%). Animals that received FCA were divided into three groups of six and those who received NaCl 0.9% were divided into three groups of two animals each. Those who received FCA were called Treatment Group (TG), and were composed of six animals grouped according to the time they were put down: TG1, put down after 7 days; TG2, put down after 21 days, and TG3, put down after 35 days. The six animals that received NaCl 0.9% were called Control Group (CG) and they were also divided into 2 animals per group according to the time they were put down: CG1, with animals put down after 7 days; CG2, with animals put down after 21 days, and CG3, with animals put down after 35 days. Osteoarticular alterations related to inflammation, synovia, coating cartilage, and chondrocytes were analyzed to establish a score. Scores for each histopathological alteration will be statistically analyzed by the Mann-Whitney U test to compare each group of the study and their respective control groups. Kruskal-Wallis, Dunn’s, and Bonferroni correction test were applied to determine the difference between the treatment group findings. It is possible to determine from this study that FCA injection produces statistically significant changes in TG1, TG2, and TG3, when comparing CG’s levels of inflammation intensity and synovial and cartilage alteration. There was no statistically significant difference for chondrocytes. TG3 is statistically different from TG1 and TG2, presenting less intense inflammatory and synovial alterations while presenting chondrocyte alterations. In this study, FCA produces inflammatory, synovial, and cartilage changes in pigs’ knees over the periods of 7, 21, and 35 days after their intra-articular injection, but they are not sufficient to characterize ostearthrosis