Vigilância entomológica de triatomíneos : análise da distribuição espacial e identificação da infecção natural por Trypanosoma cruzi, no Estado do Paraná, Brasil

Abstract

Resumo: A distribuição dos vetores da doença de Chagas e suas potenciais associações com humanos e taxas de infectividade pelo Trypanosoma cruzi permitem identificar regiões de maior risco da doença, além de favorecer tomadas de decisões assertivas em saúde pública. O trabalho teve dois objetivos, um deles vinculado a estimar a infectividade de triatomíneos por meio da amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP) e, em um segundo momento, avaliar a distribuição dos triatomíneos encontrados no estado do Paraná entre os anos de 2012 a 2021. Realizando a padronização da técnica de LAMP, com primers idealizados, alvos do gene da proteína ribossomal L3, foi possível amplificar amostras de fezes de triatomíneos sem processo de extração de DNA. Os primers foram específicos, não apresentaram reatividade cruzada com outros parasitos. Ainda, foi possível expressar e purificar uma Bst DNA polimerase funcional, demonstrando que os custos em relação a técnica por LAMP podem ser reduzidos. A seleção dos primers e a região alvo de amplificação são inéditas considerando estudos de amplificação por LAMP com o DNA de T. cruzi. Porém, apesar de promissora, as amplificações apresentaram limitações no processo de reprodução, precisando ser ajustado o processo de padronização, da técnica de LAMP, as dificuldades de amplificação podem estar relacionadas, por exemplo, com a qualidade das amostras ambientais encaminhadas. Já aplicando a modelagem de nicho ecológico com os vetores encontrados no Paraná, os mesmos, apresentaram uma alta adequabilidade climática e paisagística, principalmente na região norte. A espécie Panstrongylus megistus mostrou-se domiciliada no estado do Paraná. Ainda, as amostras apresentaram uma alta taxa de infectividade, em torno de 22,7%, valor este, que aumentou nos últimos anos. Esses achados permitiram avançar um pouco mais sobre o conhecimento dos elementos relevantes no contexto da doença de Chagas, como também, reforçou a necessidade de realização de mais estudos para a proposição efetiva de métodos mais sensíveis com baixo custo, que possam ser empregados rapidamente para confirmação da infectividade dos barbeiros encontrados nos ambientes peri e intradomiciliar

Abstract: The distribution of Chagas disease vectors and their potential associations with humans and infectivity rates by Trypanosoma cruzi allow the identification of regions at higher risk of the disease, in addition to favoring assertive decision-making in public health. The study had two objectives, one of which was linked to estimating the infectivity of triatomines through loop-mediated amplification (LAMP) and, secondly, to evaluate the distribution of triatomines found in the state of Paraná between 2012 and 2021. By standardizing the LAMP technique, with idealized primers targeting the ribosomal protein L3 gene, it was possible to amplify triatomine fecal samples without a DNA extraction process. The primers were specific and did not show cross-reactivity with other parasites. Furthermore, it was possible to express and purify a functional Bst DNA polymerase, demonstrating that costs in relation to the LAMP technique can be reduced. The selection of primers and the target region for amplification are unprecedented considering LAMP amplification studies with T. cruzi DNA. However, despite being promising, the amplifications presented limitations in the reproduction process, requiring adjustments to the standardization process of the LAMP technique. The amplification difficulties may be related, for example, to the quality of the environmental samples sent. Applying ecological niche modeling to the vectors found in Paraná, they showed high climatic and landscape suitability, especially in the northern region. The species Panstrongylus megistus was shown to be domiciled in the state of Paraná. Furthermore, the samples presented a high infectivity rate, around 22.7%, a value that has increased in recent years. These findings allowed us to advance a little further in our knowledge of the relevant elements in the context of Chagas disease, as well as reinforcing the need to carry out further studies to effectively propose more sensitive, low-cost methods that can be quickly used to confirm the infectivity of barber bugs found in peri- and intra-household environments