Aumento da eficiência dos vírus ChinNPV e HzNPV com agentes químicos que realçam sua atividade inseticida

Abstract

Resumo: Inseticidas à base de vírus têm sido utilizados no controle biológico de pragas em várias regiões do mundo, devido à sua especificidade e segurança para organismos não-alvo. No entanto, a sua aceitação como bioinsecticidas é limitada em função de seu tempo de ação relativamente lento. Para contornar essas limitações e melhorar o desempenho de vírus de poliedrose nuclear (NPV), agentes químicos com potencial sinergista têm sido estudados. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição de branqueadores ópticos na atividade viral Chrysodeixis includens nucleopoliedrovirus (ChinNPV) e Helicoverpa zea nucleopoliedrovirus (HzNPV) em laboratório, casa de vegetação e campo. Em laboratório, três concentrações (variando de 0,025% a 1,5%) de seis produtos (Fluorescent Brightener 28 - FB 28, 4,4'-Diamino-2,2'-stilbenedisulfonic acid, Calcofluor White Stain, ácido bórico, clorfluazuron e Umbeliferona), em combinação com isolados de NPV (5.000 CO.ml-1 ChinNPV e 1.000 CO.ml-1 HzNPV) foram incorporados na dieta artificial, sem formol. Os tratamentos foram oferecidos a lagartas de terceiro ínstar de Chrysodeixis includens e Helicoverpa armigera. Posteriormente, FB 28 (0,1%) foi adicionado a sete concentrações de ChinNPV em dieta artificial e oferecido à lagartas de terceiro e quarto ínstares de C. includens. As lagartas foram mantidas em BOD em bandejas plásticas (26 ± 2 °C, 70 ± 10%, fotofase de 14 h). A influência de FB 28 (0,1%) no peso larval, sobrevivência e produção de corpos de oclusão de ChinNPV foi avaliada em larvas de terceiro e quarto ínstares de C. includens. Experimentos para avaliar o efeito da adição de FB 28 (0,1%) em ChinNPV e HzNPV foram realizados em casa de vegetação e campo. Plantas de soja foram pulverizadas com duas concentrações de cada isolado viral, ChinNPV e HzNPV, e as mesmas concentrações combinadas com FB 28 (0,1%). Folíolos de soja foram coletados imediatamente e em diferentes períodos após as aplicações e oferecidos às lagartas em laboratório. A mortalidade foi avaliada diariamente até o 12º dia. Os dados foram submetidos à Análise de Sobrevida de Risco Competitivo, seguindo o modelo de Fine & Gray, para comparar as curvas de incidência acumulada de morte. Os resultados obtidos em laboratório indicam que a combinação NPV / FB 28 (0,1%) mostra efeito sinergista tanto para ChinNPV quanto para HzNPV, aumentando a atividade viral e diminuindo o tempo médio de mortalidade. A adição de FB 28 (0,1%) para ChinNPV reduziu a CL50 em lagartas de terceiro e quarto ínstares. Foi observada uma redução significativa no rendimento de COs / mg de larvas em insetos tratados com FB 28 (0,1%), independente da temperatura de incubação. Em casa de vegetação, não foram observadas diferenças significativas entre as curvas da incidência acumulada de morte entre as maiores concentrações de vírus com ou sem FB 28. Em condições de campo, FB 28 (0,1%) incrementou a atividade viral de ChinNPV e HzNPV, quando associado à concentrações mais elevadas de vírus, em até 120h após a aplicação. O uso do FB 28 não proporciona benefícios para a produção em massa do ChinNPV. No entanto, a magnitude da redução nas CL50 e a diminuição do tempo médio de mortalidade (TMM), indicam que FB 28 aumentou a virulência de ChinNPV e HzNPV

Abstract: Virus-based insecticides have been used as biological pest control in several countries/regions around the world, mainly due to their specificity and safety to nontarget organisms. However, their acceptance as bioinsecticides is limited because of their relatively slow action. To circumvent these bottlenecks and improve nuclear polyhedrosis virus (NPV) performance, synergistic agents were studied. This work aimed to evaluate effective of optical brightener additions in Chrysodeixis includens nucleopoliedrovirus (ChinNPV) e Helicoverpa zea nucleopoliedrovirus (HzNPV) viral activity in laboratory, greenhouse and filed. In laboratory, three concentrations (ranging from 0.025% to 1.5%) of the six products (Fluorescent Brightener 28 - ?????? ???????? ????????- Diamino-????????-stilbenedisulfonic acid; Calcofluor White Stain; boric acid; chlorfluazuron and umbeliferone), in combination with NPV isolates (5.000 CO.ml-1 ChinNPV e 1.000 CO.ml-1 HzNPV) were incorporated into the artificial diet, without formalin. Fluorescent Brightener 28 (0.1%) was added to seven concentrations ChinNPV. Early 3rd instar soybean loopers feeding on the diet ad libitum were kept in trays in environmental chambers (26 ± 2°C, 70 ± 10%, 14-h photophase). The influence of FB 28 (0.1%) on the larval weight, survival and occlusion bodies (OB) yield on Chrysodeixis includens third and fourth instar larvae was examined. Experiments on the efficacy of optical brightener formulations of ChinNPV and HzNPVwere conducted on soybean in greenhouses and field. Soybean plants were sprayed with two concentrations of each viral isolate, ChinNPV and HzNPV, and the same concentrations combined with FB 28 (0.1%). Leaflets were collected immediately and at different periods after applications and offered to soybean loopers. Mortality was assessed daily until the 12th day. Data were submitted to the Competitive Risk Survival Analysis, following the Fine & Gray model, to compare curves of cumulative incidence of mortality. Bioassays indicate that NPV/FB 28 (0.1%) combination showed synergist effect and the infectivity of ChinNPV and HzNPV, increased the activity viral and decreasing mean time to mortality. Addition of the selected optical brightener FB 28 (0.1%) to ChinNPV reduced the LC50 also enhanced mortality in third and fourth instar larvae. A significant decreasing in the yield of OBs/mg larval weight was observed in FB 28 (0.1%) treated insects, independent of temperature. In greenhouse, no significant differences were observed among the curves of cumulative incidence of mortality among the highest virus concentrations with or without FB 28. Under field conditions, FB 28 (0.1%) promoted enhancement in viral activity of ChinNPV and HzNPV when associated with highest doses of NPV, in up to 120 h after application. We conclude that use of FB 28 did not provide benefits for the mass production of ChinNPV. However, the magnitude of reduction in LC50s and the lower mean time to death (MTD) in C. includens indicated that FB 28 greatly enhanced the virulence of the ChinNPV and HzNPV.