Caracterização funcional de microRNAs in silico e identificação das punções de nódulos de tireoide com categoria citopatológicas do Sistema Bethesda

Abstract

Resumo: Estudos sobre o mapeamento descritivo dos casos atendidos no âmbito do Sistema Único de Saúde (SUS) sejam escassos, os registros do Sistema de Informações Hospitalares (SIH) fornecem informações que possibilitam conhecer a situação das biópsias de tireoide. Ensaios in sílico com microRNAs (pequenos RNAs não codificadores de proteínas) atuam na regulação pós-transcricional na região 3'UTR da expressão gênica influenciando na tradução dos mRNA alvo, podendo levar a inibição da tradução ou degradação do mRNAs, e trazem novos conhecimentos na tumorigênese tireoidiana. Os objetivos do presente trabalho foram delineados para caracterização funcional de microRNAs in sílico, a identificação das punções de nódulos de tireoide com categoria citopatológicas do Sistema Bethesda. Foram coletados dados de 449 pacientes submetidos à punção aspirativa por agulha fina (PAAF), cadastrados pelo Sistema de Informação Hospitalar (SIH), no período de janeiro de 2017 a janeiro de 2022, e análise citopatológica das lâminas de PAAF de 81 casos. Utilizamos modelagem de sistemas biológicos in silico para identificar microRNAs nas regiões dos intrônicos transcritos do gene BRAF. A partir dos dados do recrutamento das 449 citopunções, a média de idade foi de 56 anos. Evidenciamos uma frequência de 88,17% de doença nodular no sexo feminino. A maioria dos casos foram da categoria Bethesda II, e representam a maioria dos casos submetidos a tireoidectomia, sendo (56,55%) tireoidectomia parcial seguida de 44,45% a cirurgia de tireoide total. Os 81 casos analisados são punções de lobo direito, corados em Giemsa, com coloide ausente e aspecto celular discreto. Dentre os transcritos intrônicos do gene BRAF não codificadores de proteínas, identificamos alvos putativos para assinatura de microRNAs mir-1255, mir-562, mir-544 e mir-574, sendo que um RNAm alvo do mir-562 é o gene EIF1AX descrito recentemente como um novo gene relacionado ao câncer de tireoide. Os achados clínicos de doença nodular neste grupo de estudo submetidos à punção aspirativa por agulha fina (PAAF) foram classificados como "benignos", assim como os resultados da anatomia patológica com diagnóstico compatível com lesão benigna, seguidos daqueles tireoidectomizados por suspeita de malignidade. A prevalência de nódulos repuncionados foram na categoria Atipia de Significado Indeterminado ou Lesão Folicular de Significado Indeterminado (AUS\SFN). Consideremos a importância de estudos descritivos, ultrassonográficos e citológicos das citopunções, que tendem a compreender as principais características clínicas que afetam a doença nodular da tireoide, bem como, o reconhecimento dos mecanismos pós-transcricionais regulados por esses pequenos RNA, contribuem no diagnóstico clínico, corroborando na decisão terapêutica não só em casos de nódulos tireoidianos indeterminados, como no entendimento da doença nodular de modo geral.

Abstract: Studies on the descriptive mapping of cases treated within the scope of the Unified Health System (SUS) are scarce, the records of the Hospital Information System (SIH) provide information that makes it possible to know the status of thyroid biopsies. In silico assays with microRNAs (small non-protein coding RNAs) act in the posttranscriptional regulation in the 3'UTR region of gene expression, influencing the translation of target mRNAs, which may lead to inhibition of translation or degradation of mRNAs, and bring new knowledge in thyroid tumorigenesis. The objectives of the present work were outlined for the functional characterization of microRNAs in silico, the identification of punctures of thyroid nodules with the cytopathological category of the Bethesda System. Data were collected from 449 patients who underwent fine needle aspiration (FNA), registered by the Hospital Information System (SIH), from January 2017 to January 2022, and cytopathological analysis of FNA slides from 81 cases. We used in silico modeling of biological systems to identify microRNAs in the regions of the intronic transcripts of the BRAF gene. From the recruitment data of the 449 cytopunctures, the mean age was 56 years. We evidenced a frequency of 88.17% of nodular disease in females. Most cases were in the Bethesda II category, and represent the majority of cases undergoing thyroidectomy, with (56.55%) partial thyroidectomy followed by 44.45% total thyroid surgery. The 81 cases analyzed were punctures of the right lobe, stained with Giemsa, with no colloid and a discreet cellular appearance. Among the non-protein coding BRAF gene intronic transcripts, we identified putative targets for signature of microRNAs mir-1255, mir-562, mir-544 and mir-574, and one mRNA target of mir-562 is the recently described EIF1AX gene as a new gene related to thyroid cancer. The clinical findings of nodular disease in this study group submitted to fine needle aspiration (FNAB) were classified as "benign", as well as the results of the pathological anatomy with a diagnosis compatible with a benign lesion, followed by those who underwent thyroidectomy due to suspicion of malignancy. The prevalence of repunctured nodules were in the category Atypia of Undetermined Significance or Follicular Lesion of Undetermined Significance (AUS\SFN). Let us consider the importance of descriptive, ultrasonographic and cytological studies of cytopunctures, which tend to understand the main clinical characteristics that affect nodular thyroid disease, as well as the recognition of posttranscriptional mechanisms regulated by these small RNA, contribute to the clinical diagnosis, corroborating the therapeutic decision not only in cases of indeterminate thyroid nodules, but also in understanding the nodular disease in general.