Enterobactérias produtoras de ESBL em propriedades leiteiras do oeste do Paraná

Abstract

Resumo: A mastite é a mais prevalente infecção que atinge a produção leiteira, configurando como um quadro clínico de difícil prevenção e controle terapêutico. Porém, esta última prática empregada de forma errônea e a forma como os microrganismos colonizam a glândula mamária, contribuem para o aumento da resistência dos agentes infecciosos a antibióticos, sendo o seu uso apontado como item de seleção no microbioma bacteriano do úbere bovino. O objetivo deste trabalho foi determinar o perfil epidemiológico, molecular e de resistência associados à produção de beta-lactamases de espectro estendido (ESBL) isoladas em Enterobactérias e os fatores de risco para mastite de criatórios de bovinos leiteiros de oito municípios do Oeste do Estado do Paraná. Para tanto, foi aplicado questionário e efetuadas análises de sensibilidade fenotípica para alguns antimicrobianos e também a pesquisa molecular através da reação em cadeia pela polimerase (PCR) da presença dos genes blaCTX-M, blaSHV, blaTEM e blaOXA. Amostras de leite, obtidas de resfriadores em 69 propriedades foram coletadas e submetidas à identificação microbiológica por cultura, juntamente com teste de resistência fenotípica. A partir deste último teste, quatro propriedades foram visitadas novamente e o leite das vacas em lactação que se mostraram positivas acima de uma cruz (+) no exame CMT - California Mastis Test foi coletado. Também foram realizados suabes dos tetos, teteiras, mãos e mucosa nasal de manipuladores e, colheita de leite cru do tanque de expansão. Todas essas amostras foram semeadas em ágar screen com ceftriaxona e posteriormente submetidas à extração de DNA e reação de cadeia pela polimerase (PCR) para a detecção dos genes de resistência. Das amostras de leite cru colhidas, 27 amostras, foram sensíveis a pelo menos um antibiótico. Foram identificadas também na pesquisa, 9,90% (11/111) de cepas portadoras do gene blaCTX-M, 26,31% (5/19) de blaSHV, 3,5% (1/27) blaTEM e não foram encontradas amostras positivas para o gene blaOXA. No presente estudo foi observado, a partir de cálculo feito pelo software Epi infoTM 7 que nenhum fator de risco estudado foi significativo.

Abstract: Mastitis is the most prevalent infection that affects dairy production, configuring a clinical condition of difficult prevention and therapeutic control. However, this last practice is used erroneously and the way in which microorganisms colonize the mammary gland, contribute to the increase in the resistance of infectious agents to antibiotics, and its use is indicated as a selection item in the bacterial microbiome of the bovine udder. The objective of this work was to determine the epidemiological, molecular and resistance profile associated with the production of extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) isolated from Enterobacteriaceae and the risk factors for mastitis in dairy cattle farms in eight municipalities in the west of the state of Paraná. For this purpose, a questionnaire was applied and phenotypic sensitivity analyzes were carried out for some antimicrobials, as well as molecular research through polymerase chain reaction (PCR) for the presence of blaCTX-M, blaSHV, blaTEM and blaOXA genes. Milk samples, obtained from coolers in 69 properties were collected and submitted to microbiological identification by culture, together with phenotypic resistance test. From this last test, four properties were visited again and the milk of the lactating cows that were positive above a cross (+) in the CMT exam - California Mastis Test was collected. Teat swabs, teat cups, hands and nasal mucosa of handlers were also carried out, and raw milk was collected from the expansion tank. All these samples were seeded on agar screen with ceftriaxone and subsequently subjected to DNA extraction and polymerase chain reaction (PCR) for detection of resistance genes. From the raw milk samples collected, 27 samples were sensitive to at least one antibiotic. The research also identified 9.90% (11/111) of strains carrying the blaCTX-M gene, 26.31% (5/19) of blaSHV, 3.5% (1/27) of blaTEM and no positive samples for the blaOXA gene. In the present study, based on the calculation made using the Epi infoTM 7 software, it was observed that no risk factor studied was significant.