Modelo experimental de endotoxemia em ratos submetidos à isquemia e reperfusao de membros caudais

Abstract

Resumo: A permeabilidade intestinal às endotoxinas pode ser alterada em pacientes que são submetidos às cirurgias vasculares de grande porte. Os produtos da isquemia tecidual formados localmente nos tecidos e distribuídos na circulação sistêmica no período de reperfusão podem ser os responsáveis por esta alteração. O objetivo do presente estudo foi verificar a ocorrência de endotoxemia após indução de isquemia e reperfusão de membros caudais de ratos mediante o clampeamento da aorta abdominal infra-renal. Para tanto, realizou-se estudo experimental comparativo em grupos homogêneos de ratos machos. Foram utilizados 27 ratos da linhagem Wistar, divididos em três grupos, com nove animais cada, a saber: grupo Controle (C), grupo Isquemia (I) e grupo Isquemia e Reperfusão (I/R). Os ratos foram submetidos à laparotomia com dissecção dos vasos abdominais no grupo C, clampeamento da aorta infra-renal por duas horas no grupo I e, no grupo I/R, reperfusão dos membros caudais por duas horas após soltura dos clampes. Amostras de sangue total foram colhidas por punção cardíaca no início e fim dos procedimentos para a dosagem de endotoxinas pelo método do LAL. Os resultados demonstraram aumento dos níveis médios de endotoxinas no grupo Isquemia e Reperfusão no final do experimento (0,034 ± 0,0174 UE/ml) significativos (p<0,001) em relação aos grupos C e I, que não apresentaram endotoxemia no início e fim dos experimentos. Concluiu-se que foi necessário haver reperfusão dos membros caudais dos animais para se detectar endotoxemia pelo método do U\L; a isquemia somente não levou à detecção de endotoxinas por este método.

Abstract: The gut permeability to endotoxins may be affected after major vascular surgery. The key of this process may be the noxious products that are released by the ischemic tissue to systemic circulation when happened the reperfusion. The aim of this study was to develop in mices ischemia and reperfusion of the lower limbs by the occlusion of the distal aortic with a clamp and verify if this process alters the endotoxemia. The study design was a comparative study with 3 groups of male Wistar rats. Male Wistar rats (n=27) were randomized to controls (C), ischemia alone (I) and ischemia and reperfusion (I/R). After laparotomy the animals, in group C, were submitted to dissection of the abdominal aortic to separate the fat and the periarterial tissue. The distal abdominal aortic were clamped in group I for 2 hours and, in group I/R, the aortic was clamped for 2 hours followed by 2 hours of the reperfusion after the released of the clamp. To evaluate the effects of this process, the whole blood were taken prior and after the surgery, to measure the endotoxin level by the Lymulus Amebocyte Lisate method. There was no endotoxemia in group C and I. Plasma endotoxin increased from not detected to 0,034 UE/ml in group I/R were occurred the reperfusion (p<0,001). The ischemia alone was not responsible for the endotoxemia when the distal aortic of the rats was clamped. The reperfusion of the lower limbs was necessary to detect the endotoxemia by the LAL method.