Ação da insulina no transporte de aminoacidos neutros em cortex adrenal bovino

Abstract

Resumo: A ação estimulatória da insulina no transporte de aminoácidos neutros em glândulas adrenais de rato, foi demonstrado em 1989 por WASSERMANN e colaboradores. A partir desses conhecimentos decidiu-se investigar o transporte de aminoácidos neutros, a ação da insulina e o envolvimento desse fenômeno com os canais de cálcio dependentes de voltagem, em córtex adrenal bovino. Decidiu-se, também, investigar a ação do vanadato de sódio, um agente com atividade "insulin-like", sobre a captação de aminoácidos neutros pelas células adreno-corticais. Realizaram-se experimentos preliminares que determinaram as condições ótimas para a realização dos experimentos "in vitro" como o tempo de pré-incubação, tempo de incubação, dose de insulina e a integridade do tecido. Foram utilizados como aminoácidos modelos, não metabolizáveis, o ácido alfa-metil aminoisobutírico (14C)MeAIB, o ácido alfa-aminoisobutírico (14C)AIB e a cicloleucina (14C)Cleu. Os resultados foram expressos pela relação entre a radioatividade no tecido e a radioatividade no meio (T/M). "Slices" com cerca de 0,5mm de espessura foram pré-incubados e incubados em tampão Krebs-Ringer-bicarbonatoglicose (KRb-glicose) ou tampão KRb-glicose-colina (meio assódico), na presença ou ausência de insulina e dos fatores de teste. Nos experimentos realizados com o objetivo de verificar o envolvimento dos canais de cálcio dependentes de voltagem com a captação basal de aminoácidos e com a ação da insulina, foram utilizados bloqueadores desses canais como, verapamil, níquel e cobalto. O vanadato de sódio apresentou um efeito inibitório sobre o transporte de aminoácidos tanto em córtex adrenal bovino como em glândula adrenal de rato. Os resultados encontrados permitem indicar que o transporte de aminoácidos neutros em córtex adrenal bovino ocorre preferentemente através do sistema A que sofre a ação estimulatória da insulina. A cinética da ação hormonal no transporte de aminoácidos em córtex adrenal está caracterizada por um aumento de Vmax sem modificações significativas do Km. Os canais de cálcio dependentes de voltagem estão envolvidos tanto com a captação basal como com a ação estimulatória do hormônio. O vanadato de sódio não exerce ação "insulin-like" sobre esse fenômeno, ao contrário, enquanto a insulina apresenta uma ação estimulatória, o vanadato exerce um efeito inibitório sobre o transporte de aminoácidos através da membrana das células adreno-corticais.