Development of a process of rabies virus production using BHK-21 cell line adapted to suspension in serum free media for vaccine production

Abstract

Resumo: Soro animal é usado em cultivo celular por causa de seus fatores nutricionais, porém, seu uso é um risco potencial à saúde, devido a possível presença de agentes adventícios, tais como vírus e príons, e também é um dos principais responsáveis por reações alérgicas em cães. Células BHK-21 adaptadas à suspensão crescendo em meio de cultura padrão com 3% de soro fetal bovino foram submetidas à adaptação em meio de cultura livre de soro. Os meios de cultura livre de soro usados neste estudo foram VP-SFM, Ex-Cell 302 e Cellvento BHK-200. As células foram adaptadas ao VP por trocada direta do meio de cultura, ao Ex-Cell por troca direta e gradual do meio. Adaptação a Cellvento só foi possível usando células previamente adaptada a VP-SFM. As células adaptadas ao meio de cultura Ex Cell 302 apresentaram melhores resultados de crescimento. Todas as células adaptadas são capazes de produzir vírus da raiva. Porém, células adaptadas em VP-SFM apresentaram a melhor produtividade viral. Entretanto, produção de vírus utilizando Cellvento BHK-200 apresenta o melhor potencial econômico.

Abstract: Animal serum is used in cell culture because of its nutritional factors, however, their use not only is a potential risky for health, due to possible presence of adventitious agents, such as virus and príons, but also is the major responsible of allergic reactions in dogs. BHK-21 cells adapted to suspension growing in standard culture media with 3% of fetal bovine serum were submitted to adaptation to serum free culture media. Serum free culture media used in this study were VP-SFM, EX-CELL 302 and Cellvento BHK-200. Cells were adapted to VP by direct media change, to Ex Cell by direct and gradual media change. Adaptation to Cellvento was only possible by using cells priory adapted to VP-SFM. Cells adapted to Ex Cell culture media presented best growth results. All adapted cells have ability to produce rabies virus. Although, cells adapted to VP-SFM presented best virus productivity. However, virus production using Cellvento BHK-200 presents best economic potential.