Efeito da suplementação dietética de antioxidantes sobre variáveis reprodutivas de machos reprodutores de frango de corte

Abstract

Resumo: Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da suplementação dietética de antioxidantes sobre características espermáticas de galos reprodutores de frango de corte. Foram realizados três experimentos. No primeiro, foram utilizados 12 galos Cobb de 50 semanas de idade distribuídos aleatoriamente em um delineamento inteiramente casualizado com 2 tratamentos e 6 repetições. Amostras de sêmen foram coletadas pelo método de massagem abdominal para avaliação de volume seminal, concentração, motilidade, vigor e morfologia espermática. Às 68 semanas de idade, amostras de testículo foram coletadas para determinação da morfometria tubular dos testículos e para análise da proliferação celular no epitélio germinativo pela técnica do PCNA. A morfometria de testículos, cristas e barbelas também foram analisadas. Os dados foram submetidos à análise estatística utilizando-se o programa Statistical Analysis System com nível de 5% de significância. Houve efeito positivo (p<0,05) do blend de antioxidantes no percentual de espermatozóides normais, no peso e largura das barbelas e no peso e comprimento dos testículos. No segundo experimento, foi selecionado um núcleo de matrizes de produção de 4 aviários. Em 2 aviários, os galos receberam dieta comercial para machos e nos outros 2 aviários, os galos receberam a dieta suplementada com antioxidantes (8ppm de cantaxantina + 40 ppm de licopeno + 150 ppm de vitamina C). Na 62ª semana, foram retirados fragmentos da membrana vitelínica sobre o disco germinativo dos ovos para contagem do número de perfurações espermáticas. Foi observado um maior (p<0,05) número de perfurações nos ovos oriundos dos aviários cujos galos receberam antioxidantes na dieta. Na 68ª semana, os galos foram sacrificados e a crista, barbela, peito e testículos foram pesados e medidos. Na 66ª semana de idade, os ovos foram incubados e a progênie foi alojada no aviário experimental de acordo com o delineamento experimental dos reprodutores com 2 tratamentos e 12 repetições com 12 aves cada. Aos 7 dias de idade, foram sacrificadas 24 aves por tratamento para contagem do número de fibras e a mensuração do diâmetros das fibras musculares. Não houve efeito significativo (p>0,05) da suplementação do blend de antioxidantes na dieta dos reprodutores sobre o ganho de peso e o peso de peito da progênie aos 7 dias de idade. A contagem e diâmetro da fibra muscular não diferiu (p>0,05) entre a progênie oriunda de galos suplementados ou não. A conversão alimentar e ganho de peso na fase de 14 - 35 dias foram melhores (p<0,05) para a progênie dos reprodutores suplementados. No terceiro experimento, Foram utilizados 24 galos da linhagem Cobb, 12 galos com 25 semanas de idade e 12 galos com 50 semanas de idade. Os reprodutores foram mantidos em gaiolas (1 por gaiola) e distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 2 (idades e dietas) totalizando 4 tratamentos e 6 repetições de 1 galo cada. Os tratamentos foram compostos por: Tratamento 1 - galos com 25 semanas de idade e suplementados com licopeno, Tratamento 2 - galos com 50 semanas de idade e suplementados com licopeno, Tratamento 3 - galos com 25 semanas de idade e sem suplementação e Tratamento 4 - galos com 50 semanas de idade e sem suplementação. O licopeno foi fornecido na quantidade de 72 ppm (Licopeno 10%; Roche Vitamins). Após 12 semanas de suplementação, o sêmen foi coletado pelo método da massagem abdominal. As análises do sêmen, volume de sêmen, concentração espermática e motilidade foram realizadas imediatamente após a coleta. Todos os galos foram sacrificados para medida e pesagem de testículo, crista, barbela e peito. Fragmentos dos testículos foram fixados, emblocados em parafina, cortados e aplicados em lâminas sinalizadas para detecção de células em mitose pela técnica imunohistoquímica. Os dados foram submetidos à análise estatística utilizando-se o programa SAS. O comprimento e largura da crista dos galos mais novos foram maiores (p<0,05) em comparação aos galos mais velhos, independente da adição de licopeno às dietas. Este mesmo resultado foi observado para o peso, comprimento e espessura dos testículos. No desdobramento da interação, idade e tratamento, observou-se que a inclusão do licopeno aumentou (p<0,05) o peso vivo dos galos de 50 semanas de idade. Palavras chave: antioxidantes, peroxidação lipídica, espermatozoides, fertilidade

Abstract: With the objective of evaluating the effect of dietary supplementation of antioxidants on broiler breeder males' spermatic characteristics, three experiments were conducted. At the first experiment, 12 fifty week age Cobb roosters randomly distributed in a totally casual delineation were used with 2 treatments (commercial feed and commercial feed + antioxidant blend canthaxanthin, lycopene and vitamin C) and six repetitions. Samples of semen were collected by abdominal massage method in order to evaluate seminal volume and spermatic concentration, motility, vigor and morphology. At 68 weeks of age, testicle samples were collected to tubular morphometry determination and to analyze the cell proliferation on the germinative epithelium by PCNA technique. The testicles, combs and dewlaps morphometry was also analyzed at 68 weeks of age. The data were submitted to statistical analysis using Statistical Analysis System, with 5% of significance. It was observed a positive effect (p<0,05) of the treatment on the percentage of normal spermatozoids, on the weight and width of dewlaps and on weight and length of testicles. At the second experiment, a breeder farm coitaining 4 houses were chosen. In two of them, the roosters received a commercial male diet and in the other two houses the roosters received the same antioxidant supplemented feed used in the first experiment. At 62 week age, fragments from the vitellinic membrane were taken to spermatic perforations count. It was observed a higher (p<0,05) number of perforations in the eggs that came from the houses where the roosters had the antioxidant diet. Fertile eggs were set and the progeny was housed at the experimental barn according to the breeder males delineation with 2 treatments and 12 repetitions with 12 chicks each. At seven days of age, 24 birds per treatment were euthanatized in order to count the number of fibers and to measure the muscular fibers diameter. There was no significant effect (p>0,05) from the breeder male antioxidant supplementation on the 7 day progeny gain of weight and chest weight. The muscular fiber counting and diameter did not differed (p>0,05) between the progeny derived from the supplemented roosters and the control one. The feed conversion and gain of weight of the progeny between the 14 and 35 days of age were better (p<0,05) to the progeny derived from the supplemented males. At the third experiment, 24 Cobb roosters were used, 12 with 25 weeks of age and 12 with 50 weeks of age and distributed in a totally casual delineation in factorial system 2 x 2 (ages and diets) adding 4 treatments and 6 repetitions of 1 bird each. The lycopene were provided at 72 ppm (Lycopene 10%, Roche Vitamins). After 12 weeks of supplementation, the semen was collected by abdominal massage mthod. The semen analysis, semen volume, spermatic concentration and motility were made right after the collect. All the roosters were euthanized in order to testicle, comb, dewlaps and chest measurement and weighing. Fragments from the testicles were fixed, paraffin blocked, cut and put on marked blades to mitosis cells detection by immunohistochemistry technique. The comb length and width from the younger roosters were bigger (p<0,05) compared to the older roosters, independently from the lycopene added to the diet. The same result was observed to testicle weight, length and thickness. In the interaction unfolding of age and treatment, it was observed that the inclusion of lycopene increased (p<0,05) the weight of the 50 week age roosters. The lycopene added to the diet, independently from the males' age increased the number of positive-PCNA cells in the testicles. The using of specific diets to male is highly viable, not only by the well-known benefits about nutrition requirements on eclodibility and fertility, but also to make possible the use of additives, once the volume of feed for the male is smaller than the female feed. Keywords: antioxidants, lipid peroxidation, spermatozoids, fertility