Caracterização funcioal da proteína GINR de Streptococcus Mutans

Abstract

Resumo: A regulação a nível transcricional de genes do metabolismo de nitrogênio é bem descrita em um grande número de bactérias, como Bacillus subtilis, Corynebacterium glutamicum, Escherichia coli e Streptomyces coelicolor. Entretanto, até o momento não há informações sobre esta regulação em Streptococcus mutans. O presente trabalho tem por objetivo caracterizar a atividade da proteína GlnR, reguladora lobal da transcrição de genes do metabolismo de nitrogênio em microrganismos Grampositivos. A atividade de GlnR foi analisada por ensaios de retardamento de banda de DNA em gel. Esta proteína liga-se especificamente às regiões promotoras dos operons glnRA e amtBglnK. Além disso, experimentos de co-precipitação mostraram que GlnR liga-se in vitro a GlnK, uma proteína sinalizadora dos níveis intracelulares e nitrogênio que coordena a regulação do metabolismo de nitrogênio em procariotos. GlnK aumenta a afinidade de GlnR pelo promotor do operon glnRA. A formação do complexo GlnK-GlnR é regulada pelos níveis de 2-oxoglutarato e ADP, moléculas moduladoras da atividade de GlnK. Estes resultados sugerem o envolvimento de GlnR na regulação transcricional de genes envolvidos no metabolismo de nitrogênio em S. mutans e que a proteína GlnK é responsável pela transdução de sinal da disponibilidade de nitrogênio para GlnR e possivelmente regula sua atividade.