Susceptibilidade in vitro de Sporothrix brasiliensis protegidos em biofilmes aos antifúngicos utilizados para tratar a esporotricose humana

Abstract

Resumo: Os biofilmes de Sporothrix brasiliensis representam um desafio no tratamento da esporotricose devido à sua complexidade estrutural e resistência aos antifúngicos. Este estudo avaliou a eficácia da terbinafina (TERB) e do itraconazol (ITZ), isoladamente e em combinação, contra biofilmes de formas leveduriformes de S. brasiliensis. Sete isolados clínicos foram analisados quanto à formação de biofilme e suas alterações estruturais, utilizando espectrofotometria, microscopia confocal de varredura a laser (MCVL) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). O tratamento de biofilmes em estágio inicial (3 horas) apresentou maior suscetibilidade ao ITZ, enquanto biofilmes maduros (144 horas) responderam melhor à TERB. A análise estatística confirmou diferenças significativas entre os tratamentos (p < 0,016) e um efeito dependente da dose, embora não tenha sido observada interação sinérgica considerável entre ITZ e TERB. As análises por MCVL e MEV revelaram redução na formação e adesão dos biofilmes, desorganização estrutural e alterações morfológicas celulares após a exposição aos antifúngicos, tanto isoladamente quanto em combinação. A TERB foi significativamente mais eficaz na erradicação de biofilmes maduros do que o ITZ ou a combinação (p < 0,001). Esses achados reforçam a necessidade de intervenção precoce no tratamento da esporotricose e sugerem que a TERB pode ser uma alternativa valiosa para infecções associadas a biofilmes

Abstract: Sporothrix brasiliensis biofilms represent a challenge in the treatment of sporotrichosis due to their structural complexity and antifungal resistance. This study evaluated the efficacy of terbinafine (TERB) and itraconazole (ITZ), alone and in combination, against biofilms of yeast-like forms of S. brasiliensis. Seven clinical strains were analyzed for biofilm formation, and structural alterations using spectrophotometry, confocal laser scanning microscopy (CLSM), and scanning electron microscopy (SEM). The treatment in early-stage biofilms (3 hours) exhibited greater susceptibility to ITZ, whereas mature biofilms (144 hours) responded better to TERB. Statistical analysis confirmed significant differences among treatments (p < 0.016) and a dose dependent effect, although no considerable synergistic interaction was observed between ITZ and TERB. CLSM and SEM analyses revealed reduced biofilm formation and adhesion, biofilm disorganization, and cellular morphological changes following exposure to antifungals, both individually and in combination. TERB was significantly more effective in eradicating mature biofilms than ITZ or the combination (p < 0.001). These findings reinforce the need for early intervention in sporotrichosis treatment and suggest that TERB may be a valuable alternative for biofilm-associated infections